在SpectraMax MiniMax 细胞成像仪上通过 Oris Pro 实验进行细胞迁移分析

简介

细胞迁移（细胞从一个位置移动到另一个位置）是正常或异常细胞生命过程中的一个关键部分。细胞迁移在各种生物过程中的重要性促使了开发用于研究机制的系统，这些机制旨在确定能够促进（伤口愈合）或抑制（肿瘤形成）细胞迁移的治疗成分。

本研究着重探讨了使用 SpectraMax® MiniMax 300细胞成像计数仪的可行性，这是 SpectraMax® i3 多功能微孔板读板机的可选升级，可使用 Platypus Technologies公司 的 Oris Pro细胞迁移实验来可视化和分析细胞迁移。该检测利用无毒生物相容性凝胶，该凝胶溶解并在每个孔的中心形成无细胞检测区，从而可以研究细胞进入检测区时所涉及的细胞迁移机制。

材料和方法

细胞培养和检测

将 HT1080 细胞接种到随 Oris Pro 细胞迁移检测提供的 96 孔（20，000 个细胞/孔）或 384 孔（8，000 个细胞/孔）Corning 黑色透明底板中。这里使用了 I 型胶原蛋白包被版本（Platypus Technologies 产品目录 #PROCMACC1）。该检测使用无毒生物相容性凝胶在细胞培养表面上形成无细胞区。

接种后，将细胞置于加湿室（37°C；5% CO2）中约四小时，以允许细胞粘附。随后，将含有测试化合物 cytochalasin D（一种已知会破坏细胞迁移的细胞渗透性霉菌毒素）或含有 0.1% DMSO 空白对照的新鲜培养基加入。

48 小时后，将孔板从培养箱中取出。MiniMax 细胞成像仪用于采集每个孔的透射光图像，以便以后使用 Molecular Devices StainFree 细胞检测技术进行分析。

细胞按照制造商说明书用 CellTracker绿色 CMFDA 染料（Thermo cat. # C2925）染色，使用 MiniMax 细胞成像仪的绿色荧光通道采集荧光图像。采集图像后，进行荧光终点读取（激发 472 nm，发射 526 nm）以确定SpectraMax® i3 读板机可用于检测细胞迁移。

优势

准确测量每孔单个图像的细胞迁移

通过宽信号窗口获得 StainFree 或荧光图像分析的灵活性

使用 SoftMax Pro 软件自动分析包含迁移细胞的感兴趣区域