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    NovoCyte 检测免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤效应

    发布时间: 2020-02-25 10:24 来源: 安捷伦科技(中国)有限公司

    下载地址: NovoCyte 检测免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤效应


    肿瘤免疫治疗是应用免疫学原理和方法,提高肿瘤细胞的免疫原性和对效应细胞杀伤的敏感性,激发和增强机体抗肿瘤免疫应答,并应用免疫细胞和效应分子输注宿主体内,协同机体免疫系统杀伤肿瘤、抑制肿瘤生长,从而达到治疗疾病的目的。免疫治疗是目前肿瘤领域的研发热点,因其在某些肿瘤疾病上卓越的疗效和创新性,被《科学》杂志评为 2013 年最重要的科学突破。临床上将免疫治疗与手术、放疗、化疗和靶向治疗有机地结 合起来,是今后肿瘤治疗发展的趋势。

    细胞治疗是免疫治疗方法中的一种,主要基于免疫细胞的细胞杀伤作用。具有细胞杀伤作用的免疫细胞,包括 CTL(Cytotoxic T Lymphocyte)细胞、NK(Natural Killer)细胞、LAK(Lymphokine Activated Killer)细胞、NKT(Natural Killer T)细胞等。细胞杀伤作用分以下三种:① NK 细胞介导的细胞杀伤作用:NK 细胞对靶细胞的直接杀伤,不需要抗原致敏,无特异性;②抗体依赖性细胞介导的细胞杀伤作用(ADCC):效应细胞表面具有 IgG 的 Fc 受体,当靶细胞表面结合有特异性抗体时,其 Fc 段能与效应细胞表面的 Fc 受体结合,从而触发对靶细胞的杀伤或破坏 ; ③ CTL 介导的细胞杀伤作用:细胞毒性 T 淋巴细胞(CD8+ T)通过释放穿孔素、颗粒酶等对靶细胞的直接杀伤作用。

    检测细胞杀伤作用的方法主要有 51Cr- 释放法(51Crrelease assay)、酶联免疫斑点法(ELISpot assay)和流式细胞术。51Cr- 释放法是一种比较经典的方法,常作为细胞杀伤作用检测的金标准,但是不能在单细胞水平上检测,敏感度低,某些肿瘤细胞很难标记,标记后细胞自发释放率较高和辐射危害,给试验者带来诸多不便;酶联免疫斑点法检测的是经抗原活化后细胞分泌的细胞因子,虽具有较高敏感性、单细胞水平检测等优点,但存在仅检测胞外分泌的细胞因子和单参数分析的局限性。流式细胞术避免了放射性试剂的应用,具有简单、方便、高敏感性、单细胞水平分析和多参数选择的特点,通常用 CFSE、DiOC18、CTO 等细胞示踪染料标记效应细胞或靶细胞、选择性地结合效应细胞和 / 或靶细胞膜表面特异性标记,利用 PI 或 7-AAD 染料区分靶细胞的死活,在单细胞水平上检测细胞杀伤作用。本文使 用 ACEA NovoCyteTM系列流式细胞仪,选用 CFSE/7- AAD 法,检测 NK 细胞及双特异性单链抗体 BiTE(Bispecific T-cell Engagers)介导的 T 细胞杀伤作用。

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