快速高效的单克隆抗体 (mAb) 肽图分析:UHPLC 性能与表面多孔颗粒相结合
发布时间:
2018-11-28 11:21
来源:
安捷伦科技(中国)有限公司
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反相色谱 (RP) 肽图分析是生物治疗药物分析中最主要的技术,可为生物制药产品提供全 面的表征。当与质谱仪 (MS) 联用时,能实现对蛋白质及其变异体的鉴定,确定翻译后修 饰 (PTM) 及其位点,并确认蛋白质序列。然而,由于蛋白质裂解物固有的复杂性,使得 利用色谱进行肽图分析非常具有挑战性。因此,许多组织都致力于开发稳定、可靠的肽 图分析方法。通常而言,肽图分析受到灵敏度低、峰形差及需要较长分离时间来达到所 需分离度的影响。 近年来,人们应用超高效液相色谱 (UHPLC) 以克服这些挑战,与常规 HPLC 相比, UHPLC 经证实具有超高分离度、更高的灵敏度,且可大大缩短分析时间。UHPLC 技术 可更详尽地表征蛋白生物治疗药物,其通过加快流速、缩小粒径及缩短柱长,可在更短 的分析时间内实现更高的分离性能。但是,这种类型的分离对压力要求越来越高,不能 在常规的 400 和 600 bar 高效液相色谱仪上进行操作,严重地限制了其应用范围。
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