使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱分析聚乙二醇化蛋白质
发布时间:
2018-11-28 11:21
来源:
安捷伦科技(中国)有限公司
样品: | 聚乙二醇粒细胞集落刺激因子 (PEG GCSF) | 项目: | 分离和定量分析 |
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使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱分析聚乙二醇化蛋白质 |
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通过聚乙二醇化能够改变治疗性蛋白质的物理化学和生物性质(如提高溶解度、降低 免疫原性、延长半衰期以及防止蛋白酶破坏),从而显著提高其价值。体积排阻色谱 法 (SEC) 是检测分子量大于聚乙二醇化蛋白质杂质的首选方法。由于聚乙二醇介导的 与硅胶固定相的相互作用会导致回收率降低、峰形变差以及过度拖尾,因此聚乙二醇化 蛋白质的 SEC 分析面临着很大挑战。本应用简报描述了一种用于检测聚乙二醇粒细胞 集落刺激因子 (PEG GCSF) 的简单而灵敏的 SEC 方法。采用 AdvanceBio SEC, 130Å, 7.8 × 300 mm, 2.7 µm 色谱柱在水相流动相下进行 PEG GCSF 的分离和定量分析。线性 曲线在 12.5-2000 µg/mL 的范围内具有优异的相关系数,表明该方法适用于定量分析。该 方法具有出色的保留时间和峰面积精度,证明了该方法的适用性。此外,AdvanceBio SEC 还可对强制应激研究中得到的聚集体进行分离与定量分析。
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