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工商注册信息已核实!领域: | 生物制药/仿制药 | ||
样品: | 抗体药物偶联物 | 项目: | 药物/抗体比率 |
参考: | Debaene, F., et al., Innovative native MS methodologies for antibody drug conjugate characterization: High resolution native MS and IM-MS for average DAR and DAR distribution assessment. Anal Chem, 2014. 86(21): p. 10674-83 |
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使用 UHPLC/Q-TOF 联用系统测定抗体药物偶联物 (ADC) 的药物/抗体比率 (DAR) |
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本文以半胱氨酸连接的抗体药物偶联物 (Antibody-Drug Conjugate, ADC) 为研究对 象,使用连接 PLRP-S 反相液相色谱柱的 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统分离还原的轻链、重链和相对应连接药物的轻重链,并通过 Agilent 6530 高分辨率四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统对各个色谱峰进行鉴定。通过积分处理紫外吸收图谱中各 轻重链的峰面积百分比,结合各个峰的偶联药物数目,计算 ADC 的加权平均药物/抗体比率 (Drug to Antibody Ratio, DAR)。同时使用了安捷伦 DAR 计算器 (Agilent DAR Calculator) 对质谱解卷积结果进行 DAR 值计算,所得结果与紫外吸收图谱计算所得结果相同。
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