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领域: | 多组学/蛋白质组/代谢组/脂质组 | ||
样品: | 水果和蔬菜 | 项目: | 催化活性浓度 |
参考: | 《IFCC 在 37 °C 酶催化活性浓度测量的原级参考方法第 4 部分:丙氨酸氨基转移酶催化浓度测定参考方法》 |
方案文件名 | 下载 |
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使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计测定丙氨酸氨基转移酶催化活性浓度 |
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本研究参照《IFCC 在 37 °C 酶催化活性浓度测量的原级参考方法第 4 部分:丙氨酸氨基转移酶催化浓度测定参考方法》[1],使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计对丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 的催化活性浓度进行监测。该方法中的基本原理是:在 37 °C 的恒温条件下,L-丙氨酸与 2-酮戊二酸在 ALT 的催化下生成丙酮酸和 L-谷氨酸,丙酮酸与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH) 在乳酸脱氢酶的作用下生成乳酸和 NAD+(如以下反应方程式所示);然后通过监测 339 nm 下 NADH 的氧化速率(即吸光度的下降速率)来测定丙氨酸氨基转移酶的催化活性浓度,二者呈正比关系。
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