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解决方案|东西分析高效液相色谱仪-蒸发光检测器在中药分析中的应用
高效液相色谱(HPLC)以其灵敏、快捷、可分离大多数液体样品等优点,已经广泛应用于中药的有效成分含量测定、组分分析、指纹图谱等方面,检测器除了最常用的紫外检测器（UVD）之外,还有荧光检测器（FLD）, 蒸发光散射检测器（ELSD）,示差折光检测器（RID）等。紫外检测器因其高灵敏度和稳定性,在HPLC中应用广泛,但它所能检测的物质需要具有吸收紫外光的生色团,而相应的流动相在检测波长下则应当是无紫外吸收的。这一特性一定程度上限制了其能检测的物质范围和一些良好溶剂的使用。荧光检测器只能检测有荧光的物质,应用范围很小。示差折光检测器是一种通用的检测器,它是基于色谱柱流出物光折射率的变化来连续测定样品浓度。但它对工作环境要求苛刻,要求恒温,恒流速,且无法采用梯度洗脱,检测灵敏度也不够高。蒸发光散射检测器一定程度上弥补了HPLC传统检测器的不足,特别是无紫外或紫外末端吸收的大分子有机化合物的检测,显示出极大的优越性。其响应值不依赖于样品的光学性质,不论它具有何种官能团,对未知物和纯度的测定要比UV检测更容易更准确。
中药的化学成分复杂,部分成分不存在紫外吸收或仅在紫外末端有吸收。加上色谱分离的困难以及流动相带来的干扰,使用传统的紫外检测器对其进行定性定量分析十分困难。ELSD在某种程度上弥补了这方面的不足,被广泛的应用于皂苷类成分、糖类成分、内酯类成分、部分生物碱类成分、萜类成分和其他一些成分的分析。本文主要介绍了东西分析LC-5510高效液相色谱仪EL-100蒸发光散射检测器在中草药方面的应用并取得了满意的效果。
LC-5510高效液相色谱仪EL-100蒸发光散射检测器
案例一：黄芪甲苷 皂苷类成分分析
测试条件
流动相：35%ACN
色谱柱：NLAB C18 4.6*250mm
样品：黄芪甲苷 250ppm
流速：1ml/min
漂移管温度：70℃
气体流速：900ml/mim
Smooth: 80
Gain: MED
Pmt高压：480V
进样量：20ul
测试谱图
黄芪甲苷的液相色谱图
黄芪甲苷重复进样液相色谱图
黄芪甲苷重复进样平移后液相色谱图
测试结果
案例二：银杏叶中内酯类成分分析
测试条件
流动相：甲醇-四氢呋喃-水（25:10:65）
色谱柱：NLAB C18 4.6*250mm
样 品：银杏内酯A 0.236mg/ml
银杏内酯B 0.092mg/ml
银杏内酯C 0.176mg/ml
白果内酯 0.252mg/ml
漂移管温度：65℃
气体流速：900ml/mim
Smooth:80
Gain: MED
Pmt高压：480V
进样量：20ul
测试谱图
银杏叶中内酯A\B\C及白果内酯的液相色谱图
银杏叶中内酯A\B\C及白果内酯重复进样的液相色谱图
银杏叶内酯A\B\C及白果内酯重复进样平移液相色谱图
测试结果
案例三：咖啡因生物碱类的分析
测试条件
流动相：MEOH
色谱柱：NLAB C18 4.6*250mm
样品：caffeine 500ppm
流速：1ml/min
漂移管温度：35℃
气体流速：900ml/mim
Smooth:80
Gain:MED
Pmt高压：480V
进样量：20ul
测试谱图
咖啡因样品重复进样液相色谱图
咖啡因样品重复进样平移液相色谱图
测试结果
案例四：齐墩果酸、熊果酸萜类分析
测试条件
流动相：甲醇-0.2%醋酸（88:12）
色谱柱：NLAB C18 4.6*250mm
样品：齐墩果酸50ug/mL、熊果酸0.1mg/mL
流速：1ml/min
漂移管温度：60℃
气体流速：900ml/mim
Smooth:80
Gain: MED
Pmt高压：480V
进样量：20ul
测试谱图
齐墩果酸、熊果酸样品液相色谱图
齐墩果酸、熊果酸样品重复进样液相色谱图
齐墩果酸、熊果酸样品重复进样平移液相色谱图
测试结果
到目前为止，应用HPLC-ELSD方法已经对多种常用中药进行了分析，有效的建立或提高了质量控制方法，在中国药典中已得到验证。今年，2020版《中国药典》将于2020年12月1日正式实施，这将对整体提升我国药品标准水平，提高药品质量，保证公众用药安全有效，促进医药产业高质量发展发挥重要作用。我们东西分析将会紧随药典的步伐，完善、改进相关的产品，开发更多的解决方案，希望给行业内工作者带来更快捷有效的服务！
| 标签： | 东西分析，液相色谱，蒸发光检测器，中草药 |
