CRISPR/Cas9基因敲除技术服务

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CRISPR/Cas9基因敲除技术服务


 

CRISPR/Cas9 产品及服务
 

AAV-SaCas9在体敲除技术服务
 
科维创生物技术工程师运用CRISPR/Cas9基因敲除技术，将腺相关病毒与SaCas9结合，即AAV-SaCas9，可以实现高效在体基因敲除，也是最新最领先的在体基因敲除技术。 欲了解AAV不同的血清型及滴度请咨询全国免费服务热线：400-092-0065！

高效极速基因敲除神器-Crispr/Cas9 腺病毒
 

科维创生物创新性的首次将cas9和gRNA整合到腺病毒载体中，成功包装cas9腺病毒和gRNA腺病毒，很大程度上弥补了crispr/cas9质粒感染效率低，从而导致敲除效率低的缺陷。

科维创生物推出的Cas9/gRNA腺病毒利用cas9和gRNA结合特异性，同时借助腺病毒高感染效率，高表达效率，提高crispr/cas9基因敲除效率，缩短基因敲除周期，使得基因敲除周期短，成本低，更易于操作。

Crispr/Cas9 慢病毒

科维创生物独创性研发出慢病毒Cas9表达体系。该体系采用慢病毒体系先在细胞中稳定表达Cas9蛋白，构建稳定表达Cas9蛋白的细胞系，再在该细胞系的基础上导入gRNA和基因敲除实验中用到的其它原件。该体系采用慢病毒体系先在细胞中稳定表达Cas9蛋白，构建稳定表达Cas9蛋白的细胞系，再在该细胞系的基础上导入gRNA和基因敲除实验中用到的其它原件用于特异性基因敲除。

 CRISPR/Cas9 基因敲除原理介绍

CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中，CRISPR系统共分成3类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白（Cas蛋白）共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可，这为其能够广泛应用提供了便利条件。

目前，来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白（含有两个核酸酶结构域，可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，形成RNA-DNA复合结构，进而对目的DNA双链进行切割，使DNA双链断裂。 

由于PAM序列结构简单（5’-NGG-3’），几乎可以在所有的基因中找 到大量靶点，因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞，是目前最高效的基因组编辑系统。 

通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造，将其连接在一起得到sgRNA（single guide RNA）。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力，但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接，得到可以同时表达两者的质粒，将其转染细胞，便能够对目的基因进行操作。

      图示：Cas9通过向导RNA结合到目标DNA上并进行切割 

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途