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microRNA芯片技术服务

参考报价: 面议 型号: microRNA芯片技术服务
品牌: 拓普生物 产地: 广东
关注度: 15 信息完整度:
样本: 典型用户: 暂无
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                       Small RNA,即小 RNA,是一类大小约 18~40 个碱基的单链小分子 RNA,主要包括 microRNA(miRNA)、piRNA、snoRNA、snRNA、tRNA 等。小 RNA 在细胞内有重要的调控功能,具有作为疾病诊断标记物戒药物靶标的潜力,被广泛研究。
microRNA(miRNA)属于small ncRNAs,是单链的短RNA,长度在22nt左右。microRNA是基因表达的主要调控分子,以序列互补的方式与特意靶mRNA结合,通过降解靶mRNA或抑制其蛋白翻译调控靶基因的表达。microRNA不但在基本的生物过程,如发育,应激反应,代谢和基因组完整性维持等方面有基本而且重要的调控作用。在疾病的发生发展全过程中也发挥着重要的调控作用。
一:实验流程
1. 样品RNA 抽提
    a. 实验对象为组织样品,取适量(50-100mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,使用BioPulverizerTM冰冻粉碎组织,加1ml的RNA抽提试剂Trizol(Invitrogen),使用Mini-Bead-Beater-16匀浆后抽提RNA。
b. 实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,加1ml的RNA抽提试剂Trizol(样品为贴壁细胞,每10cm2培养皿Trizol使用量为1ml),裂解后抽提RNA。
2. RNA 质量检测
    a. 使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值,以计算浓度并评估纯度。
    b. 用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳,检测RNA 纯度及完整性。
    c. 提供RNA QC报告。
        注意:用于芯片检测的RNA 样品,必须是高质量的,完整的,没有RNase污染(降解的样品不能用于标记和芯片检测),没有基因组污染。
3. 制备荧光标记探针
    采用miRCURY™ Array Power 标记试剂盒,用标记酶将Hy3™或Hy5™荧光基团标记miRNA,可以得到用于与芯片杂交的荧光探针。
4. 芯片杂交
    在标准条件下使用PhalanxTM的热收缩杂交袋将标记好的探针和miRCURY™芯片杂交。
5. 图像采集和数据分析
    使用GenePix 4000B 芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度,并将实验结果转换成数字型数据保存,使用配套软件对原始数据进行分析运算。
6. 提供实验报告
   包括详细的实验方法和芯片实验数据和图表
 


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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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