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外泌体整体研究方案
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                       啥是外泌体?
外泌体(Exosome)是一种由活细胞分泌的圆形(dish)或杯状(cup)脂质双分子层膜微小囊泡,直径约30-100nm,可由各种类型的细胞分泌,广泛存在于血液、尿液、唾液、滑膜液、乳汁、脑脊液、眼泪、腹水、羊水等各种体液以及细胞培养上清中。外泌体是一种活性复合体,包含复杂的蛋白质,核酸和脂质。




外泌体分离纯化方法

方法优点缺点差速离心法分离纯化后纯度高费时费力,产量低,回收率不稳定蔗糖密度离心法分离纯化后纯度高费时费力,产量低,硬件要求高(需超速离心机),对离心时间敏感超滤离心法操作简便高效,不影响外泌体活性成本高,需要的样本起始量大试剂盒法效率高,对硬件要求低杂蛋白多,纯度低,回收产物可能不兼容下游实验



外泌体鉴定方法
NTA鉴定 纳米颗粒跟踪分析(Nanopraticle Tracking Analysis, NTA)技术可以对10-2000nm范围内的纳米颗粒进行快速实时动态检测,测量参数包括颗粒粒径、散射光强、浓度等,可对外泌体进行粒径大小及数量进行统计并做出初步质量评估。


电镜鉴定  通过负染的方法,在电镜下直接观察单个外泌体的形态结构与大小,如下图。该鉴定基于透射电镜平台,仪器需要专业的技术人员进行操作。

外泌体研究案例
外泌体来源广泛,可从不用类型的样本中提取外泌体。通用型的外泌体研究方法见下图。


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