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免疫蛋白印迹(Western blotting)-免疫蛋白印迹法

参考报价: 面议 型号: 免疫蛋白印迹(Western blotting)
品牌: 维伯鑫生物 产地: 中国
关注度: 33 信息完整度:
样本: 典型用户: 暂无
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AI问答
可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?


                       技术背景
      蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治·斯塔克(George Stark)。在尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》(Analytical Biochemistry)中首次被称为Western Blot。蛋白免疫印迹(Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现己广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
 
技术原理:
      Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似,但Western Blot法采用的是凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过SDS-PAGE(凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
 
操作流程:
1、蛋白样品制备及含量测定;
2、SDS-PAGE电泳;
3、转膜及免疫反应;
4、化学发光,显影,定影;
5、凝胶图象分析;
6、提供完整的实验资料(实验记录、胶片等资料)
 
样品准备条件:
细胞样品:收集细胞后放入液氮中速冻保存或速冻24 h后转入-80 °C冰箱保存。
组织样品:动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存,液氮冻存24 h后可转入-80 °C冰箱保存。
运输条件:样品运输条件根据实验样品的处理条件,可以选择液氮或者干冰运输,所有样品的处理和保存过程中,切忌反复冻融。
 
送检需要提供:
样本要求:新鲜且足量的样品(组织不少于50 mg,细胞不少于106),或提取的总蛋白(≥ 50 μl)
客户提供有效的一抗(国产抗体一般不接纳),若无一抗,可有偿使用公司备存抗体或代购
客户提供欲检测目的蛋白的详细背景资料。以及提供样本的种属,类型。
 
实验完成提供:
实验结果原始胶片、实验结果电子图片、目的条带灰度值、详细的实验步骤等
实验周期:2周。
收费标准:询价。

western bolt实验结果图

注意事项:
1、客户要确保模型建造的成功性。
2、客户要确保抗体的有效性。
3、如要加快的客户可以和我们联系沟通。
4、收费标准:以每张膜8个样本收费,不足8个样本的按8个样本收费
 
公司介绍:
广州维伯鑫生物科技股份有限公司是一家从事生物医学科研技术服务和产品的高科技公司,坐落于广州科学城国家级科技企业孵化器内。搭建了完善的实验平台,包含2个标准化细胞房、动物房、国家标准的PCR实验室、蛋白病理综合实验室及千余平方的GMP洁净厂房等,并与国内外知名医学院校和科研机构建立了良好的合作关系,先后主持了教育部产学研项目和广东省、广州市创新基金项目,并获得广东省科学技术厅、广东省财政厅、广东省国家税务局、广东省地方税务局联合认定的高新技术企业。
维伯鑫生物科研团队具有丰富的科研经验,立足于生物医学领域,以客户需求为导向,为广大科研工作者建立了实验方案评估和优化、动物实验、细胞实验、基因水平实验、蛋白质水平实验、整体课题协作服务等平台。多年来,维伯鑫生物秉承“专业、专注;精细、精确”的服务态度协助广大科研工作者完成了数百项国家自然科学基金、省自然科学基金及各市、地区基金项目,为客户了提供最佳的实验设计优化服务和专业的实验解决方案,帮助科研工作者缩短科研周期、节省实验成本,使客户的科学研究具有持续性,广受好评。

服务流程:                                                                   
维伯鑫生物科研平台包括:
 具体实验案例:
 


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