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DNA提取纯化服务

参考报价: 面议 型号: DNA提取纯化服务
品牌: 易科攀搏生物 产地: 北京
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实验原理及步骤:
DNA的提取可以简单的分为裂解和纯化两大步骤,裂解是破坏样品细胞结构,从而使样品中的DNA游离在裂解体系中的过程,纯化则是使DNA与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。
 

常规的裂解液都含有去污剂 (如SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20等) 和盐 (如Tris、EDTA、NaCl等)。

去污剂的作用

使蛋白质变性;

破坏膜结构;

去除与核酸相互作用的蛋白质。

盐的作用

提供合适的裂解环境,如Tris;

抑制核酸酶对核酸的降解,如EDTA;

维持核酸结构稳定,如NaCl。

裂解体系中还可能加入蛋白酶,利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段,促进DNA与蛋白质的分离,同时,也便于后续的纯化操作。

纯化过程酚氯仿抽提

该方法包括两个步骤:

利用酚氯仿对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质,实现DNA与蛋白质的分离;

再用醇将DNA沉淀下来,实现核酸与盐的分离。

酚氯仿抽提是去除蛋白质的有效手段,但如果蛋白质含量超过了其饱和度,裂解体系中的蛋白质就不会被一次性去除,需要进行多次反复抽提,而每次的抽提均会导致核酸的损失。

酚氯仿抽提最大的优势是成本低廉,对实验条件要求较低。

高盐沉淀法

高盐沉淀法是酚氯仿抽提方法的一个变种,其省略了酚氯仿抽提操作的麻烦,并且几乎克服了酚氯仿抽提方法的一切缺点,只是得到DNA的纯度不够稳定。

离心柱纯化

该方法利用某些固相介质,在某些特定的条件下,选择性地吸附核酸而不吸附蛋白质及盐的特点,实现核酸与蛋白质及盐的分离,是目前试剂盒提取广泛使用的方法。

该方法受人为操作因素影响小,提取DNA的纯度稳定性很高,其缺点是当样品过量时,需要反复进行离心,对样品的提取效率较低。

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    北京易科攀搏生物科技有限公司,于2013年注册,由海归的生物学博士与国内优秀生物学、医学博士学位获得者联合成立,招聘了诸多留学人员与国内优秀博士作为专兼职编辑,以及优秀的实验技术人员。目前,公司拥有技术实验人员及专兼职编辑60余人,分布在分子生物学、细胞生物学、动物建模、基础医学、临床研究等各个领域。公司目前已经有500余项目成功案例;300余国家、省市课题设计经验;200余基础课题协助完成;80余全国三甲医院、医药企业合作。公司实验室平台占地10000平米,有独立的分子实验、细胞实验、动物实验平台,有承接绝大部分实验的能力。

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