DNA常规测序

 
    艾基生物有近十年的Sanger测序经验，针对样品的复杂程度摸索出一系列的解决方案，并且在Sanger测序平台的基础上将应用扩展至分子生物学上游的多个领域，包括：SNP 检测，片段分析， SSR/STR分型， 基因检测， 菌种鉴定， 线粒体测序， 基因组测序， 跑板等服务。
 
  平台优势  

质量稳定：精确读长达800bp以上，有效读长度超过900bp
准确度高：QV20+和CRL值>1000
时效性强：日均处理量>2000个反应，结果及时、准确
困难模板：成熟的方案应对High GC，AT rich，发夹结构，重复序列
一站式服务：基因组提取、引物设计、PCR扩增、Primer Walking、测序及结果分析

  技术流程  
 

  送样要求  

菌液和平板

需过夜培养的菌液，至少提供200ul；无需培养的，提供2-4ml过夜培养的菌液；

样品注明抗性，常备抗生素：氨苄青霉素(Amp)、卡那霉素(Kan)、氯霉素(Chl)；

若菌液所含质粒为超低拷贝，请直接提供质粒；

除大肠杆菌以外的菌液，请直接提供质粒。

   
质粒

浓度>50ng/ul，总体积不少于10ul；

请确保质粒溶解于灭菌的双蒸水中，TE溶解的质粒会造成反应失败。

   
PCR产物

已纯化PCR产物：

请确保DNA溶解于灭菌的双蒸水中，浓度>30ng/ul，总体积不少于20ul。

未纯化PCR产物：

请注明片段长度，条带是否单一，原液总体积不少于20ul；
片段<100bp建议克隆后测序；片段>4kb 建议分段扩增后测序。
 
测序引物

浓度≥5pmol/ul，总体积不少于10ul，并确保溶解于灭菌的双蒸水中；

测序引物长度尽量控制在20-30bp，引物过短或过长均会影响测序质量；

荧光标记或修饰的引物不适用于测序。

  订单填写及注意事项  
 

样品登记表需按要求填写详细，避免问题订单带来的实验延误；

确保样品名称与登记表名称一致，可包含“字母”、“数字”、“—”；请避免出现 汉字、拉丁字母及其他特殊字符；

填写“测通”的样品会默认拼接，“双向”测序的样品如需拼接请注明；

如样品为菌液或平板，请注明抗生素类型；

若测序引物不是通用引物，请自备或委托合成，选择引物类型（通用/新送/已送/需合成）并注明浓度；

若送测质粒不是常用载体，通用引物请写明引物全称；

未纯化PCR产物若已检测为单一条带，请在订单中注明，可大大提高测序成功率；

存在特殊结构的，如：High GC、AT rich、重复序列、发夹结构请在订单上备注；

大量样品送测时，请使用电子订单，方便核对且不易出错。

 
  交付结果  

交付形式：
电子邮件发送（请确保邮件地址填写无误并添加邮件地址白名单）；
客户登录《艾基生物订单查询系统》自行查询进度和下载结果。

报告内容：
一份.ab1 格式的峰型彩图：chromas 或者 FinchTV 免费软件打开；
一份.seq 格式的序列文件：文本文档或常用生物软件打开；
*如需拼接的会提供一份.txt格式的拼接结果。

  服务价格  
 

艾基生物广州实验室目前有两台ABI 3730xl 高通量DNA测序仪， 配备50cm毛细管、高分辨率液态分离胶，可提供稳定、高质量的跑板服务。
常规测序跑板：500元/板。
SSR跑板：650元/板
可检测以下两组荧光组合：
I ：FAM（蓝），HEX（绿），TAMRA（黄）,ROX（红），LIZ（橙）
II ：FAM（蓝），VIC（绿），NED（黄），PET（红），SIZ(橙)
其中LIZ，SIZ为内标。
 

  样品保存  

引物（100 pmol/ul）保存1个月，菌液，质粒，PCR产物保存2周。

DNA常规测序信息由广州艾基生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于DNA常规测序报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途