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工商注册信息已核实!参考报价: | 面议 | 型号: | 骨髓内皮组细胞原代培养实验动物 |
品牌: | 瑞金特生物 | 产地: | 北京 |
关注度: | 7 | 信息完整度: | |
样本: | 典型用户: | 暂无 |
400-6699-117转1000
清洁级SD大鼠,雌性,3-4周,若干。
主要试剂配制
(1)EBM-2Kit培养基:按说明书加入生长因子和血清(2%FBS)。
(2)PBS磷酸盐缓冲液: PBS粉剂用ddH2O定容至1000 mL,调pH7.2,121℃、30min高压灭菌,4℃保存备用。
细胞操作实验方法
(1)取SD大鼠,颈椎脱臼法处死后立即用75%乙醇浸泡,移入超净工作台内,用大头针固定大鼠四肢于工作台面的泡沫板上。(2)碘酒擦拭四肢,再用酒精棉球擦拭,无菌条件下分离出大鼠股骨和胫骨,剔除骨头表面肌肉,PBS溶液冲洗两遍。
(3)去除骨骺端,用1mL无菌注射器吸取DMEM溶液冲洗骨髓直至骨髓腔变白,吸入离心管内,1000rpm离心5min,弃上清。用PBS重悬细胞沉淀。
(4)缓慢将细胞悬液加入预先装有5mL淋巴细胞分离液的15mL离心管内,保持细胞悬液在淋巴细胞分离液上层,注意不要搅动液面,保持二者分层界面。
(5)2000rpm离心20min,离心后溶液分5层,吸取中间骨髓基质细胞层(白膜层),PBS洗3次。
(6)用含生长因子和血清(2%FBS)的EBM-2培养基以106/mL细胞浓度接种于6孔板中,置37℃、5%CO2恒温培养箱中培养,48h后取出未贴壁细胞继续培养。
四、无菌操作注意事项
细胞培养一定要保持工作区的无菌清洁,先用紫外灯和臭氧杀菌1h,然后通风30min,操作前需要换细胞间专用拖鞋,双手带上一次性橡胶手套并用75%乙醇消毒,穿上实验服,戴上一次性口罩和帽子,整个无菌操作都应该在酒精灯的周围进行。
五、服务流程:
骨髓内皮组细胞原代培养实验动物信息由北京瑞金特生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于骨髓内皮组细胞原代培养实验动物报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途