初代组织块培养：
取新鲜肝脏，先剥除被膜和血管等纤维成分，用刀或剪刀把肝脏剪成1mm3 左右的小块，采用帖壁培养法。
初代消化法培养：
1．把肝组织切成2～4 立方毫米的小块，用不含钙镁的BSS 液洗两次。
2．移入1：1 的0.1％胰蛋白酶和0.1％胶原酶（都用无钙镁BSS 配置）中，4℃冷消化10～12 小时后，通过250 微米和64 微米尼龙网或不锈钢纱网滤过。
3．收集细胞、BSS 液洗1～2 次、计数、接种培养。
消化培养肝细胞的另一种方法是灌流法（肝脏灌流需用全肝，以较小动物如小鼠和大鼠为好）：
1．无菌解剖动物，取出肝脏，先用BSS 洗除血污。
2．取5ml 注射器一支，吸取消化液后，把注射器头轻轻插入肝管中，用线绳结扎牢固，以防消化液漏出，轻轻把消化液注入肝管系统，并不时轻揉压肝脏，以便消化液进入肝小叶中；消化液在肝内停留20～30 分后，在吸出消化液的同时并轻揉压肝脏，以使肝细胞脱落和消化液吸出。
3．待吸净消化液后，注入离心管中，低速离心分离，用RPMI 1640 培养基培养（较其它培养基为好），能获得较纯的肝上皮细胞和获较好的效果。
传代培养：
待细胞生长连接成片后，用BSS 洗一二次，加1：1 的0.025％胰蛋白酶和0.02％ EDTA 混合消化3～5 分钟，待细胞回缩，便停止消化，弃掉消化液，用BSS洗一二次，注入营养液，吹打，制成细胞悬液，再接种培养。
无菌操作的注意事项：
细胞原代培养一定要保持工作区的无菌清洁，先用紫外灯杀菌1h，操作前用75%乙醇消毒，穿上实验服，戴上口罩和帽子，操作时不能大声说话，双手戴上一次性橡胶手套，整个无菌操作都应该在酒精灯的周围进行。
服务流程：

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途