SDS-PAGE电泳

定义：聚丙烯酰胺凝胶电泳，用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。

一般实验过程： 

1、样品的制备 取样品20ul，加入5×样品缓冲液5ul，在80℃水浴锅中煮5min。

2、配置凝胶 按照上面配方制SDS-PAGE凝胶，安装好电泳仪，在槽中加入电极缓冲液。 

3、上样 按一定顺序在加样孔中加入样品，根据SDS-PAGE电泳玻璃板间隙厚度不同，选择加入样品量，一般0.75mm间隙15孔的上样量<10uL/孔,1mm间隙10孔的上样量<20ul/孔。

4、电泳 打开电源将电压调到80v（一般15min左右），待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 

5、染色 将凝胶小心取下放入容器中，加入染色液，用摇床摇2－3h

6、脱色 待条带清晰后倒出染色液，加入脱色液过夜 

7、成像 将脱色液倒掉，可以用相应的成像系统拍照、分析、估算蛋白浓度 

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