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基于高效微流电动液相色谱系统分离检测强阳离子交换亲水性多肽

发布时间: 2019-12-13 16:11 来源:上海通微分析技术有限公司

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      毛细管电色谱(CEC)是一种集高效液相色谱(HPLC)的高选择性和高效毛细管电泳(CE)为一体的小型液相色谱技术。自1974年第一次报道CEC以来,随着理论和应用的发展,CEC已成为一种强大的分离技术。然而,这种技术的发展速度受到了实际问题和困难的阻碍,主要包括色谱柱的制造,再生和仪器有关。在“纯”CEC中,由于焦耳加热,经常遇到形成气泡和干涸的问题。并且因其没有注射阀,难以实现样品的定量注射。

       为了减少气泡的形成,HPLC泵已经与CEC系统相耦合,最终形成一种被称为高效微流电动液相色谱系统(eHPLC)的混合技术。在这种新颖的分离技术中,压力和电场都可以施加在填充的毛细管色谱柱上,有利于中性和带电物质的分离。 此外,eHPLC可实现溶剂的梯度洗脱和定量注射。

       我们研制的eHPLC系统,可用于高效微流电动液相色谱、微流液相和毛细管电泳等实验。并研究了eHPLC在亲水性和强离子交换混合模式下多肽的分离。对于多肽等带电物质,eHPLC模式下的保留机制是基于色谱分离和电泳迁移。因此,可以通过改变电场和压力来调节多肽的洗脱。并且我们评价了亲水性相互作用、离子交换和电迁移对多肽分离的贡献,并讨论了保留机制。用梯度洗脱法分离eHPLC系统中的多肽,研究了压力、电场、有机溶剂、pH值、离子强度等因素对多肽混合物分离的影响。

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