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磷酸化相关检测

参考报价: 面议 型号: 磷酸化相关检测
品牌: 科斯莫生物 产地: 天津
关注度: 3 信息完整度:
样本: 典型用户: 暂无
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                       Western blot/ELISA/IHC/质谱等方法检测
protein磷酸化:
发生于Ser残基,一般与基因活化相关,直接影响目标的活性和功能。这种关键的翻译后修饰调控了广泛的细胞活性,包括细胞周期、分化、代谢和神经元通讯。此外,异常的磷酸化事件与许多疾病状态相关。
 

本公司提供磷酸化检测方法:  
激酶活性分析:
生物学样品中的激酶活性通常是在体外测定的,在ATP的存在下将免疫沉淀的激酶与外源底物共同孵育。之后通过一些报告系统来评估特定激酶对底物的磷酸化,包括显色、放射性或荧光检测。
Western blot:
评估protein磷酸化状态的最常用方法,许多磷酸化特异抗体十分灵敏,可轻松检测常规样品(如10-30μg细胞提取物)中的磷酸化蛋白。由于测得的磷酸化蛋白水平可能随处理或凝胶上样误差而变化,研究人员常常利用一个抗体来检测同源蛋白的总水平(而不考虑磷酸化状态),以确定磷酸化组分相对于总组分的比例,并充当上样内对照。
酶联免疫吸附分析(ELISA):
已逐渐成为测定protein磷酸化的一种有力方法。磷酸化特异的ELISA技术具有一些优点。1. 利用经过校准的标准品,定量结果更准确。2.特异性更高。3.灵敏度更高,可以检测低丰度的蛋白。4. 高通量检测。
细胞内流式细胞术和ICC/IHC:
流式细胞仪利用激光来激发用于抗体检测的荧光染料。通过细胞表面标志的分型可检测异质群体中特定细胞类型的蛋白,通过这种方法可分析稀有的细胞群体,而不用担心细胞损失或细胞分选过程中可能发生的蛋白表达变化。
ICC通常指的是利用显微镜对培养细胞中的蛋白进行检测,通常是确定细胞内定位的首先方法;而IHC指的是对完整组织切片中的蛋白进行检测。
质谱:
复杂的生物样品(如细胞裂解液)中蛋白质磷酸化的全面评估(磷酸化蛋白质组学),包括磷酸化蛋白和磷酸化肽段的鉴定,以及磷酸化残基的测序。

相关要求:
客户需提供研究用细胞或组织,各种指标检测相应抗体。
 
最终结果:
1. 原始实验结果;
2. 具体试验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号;试剂厂家)
 

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科斯莫生物相关服务:
       MicroRNA相关服务、siRNA干扰、课题整体外包服务、基因克隆服务、慢病毒包装服务、腺病毒服务、稳定细胞株筛选服务、蛋白表达服务、抗体制备服务、DNA与蛋白相互作用研究、噬菌体展示技术服务、cDNA文库构建、干细胞研究、基金申请、标书撰写、专利申请、课题设计等

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