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- 「青莲百奥」重磅升级|TMT标记定量蛋白质组告别“搭桥”省时省力省钱 发布时间：2023-08-28 12:26
- TMT标记定量蛋白质组学可以表征生物系统中的全部蛋白质，目前已成为解决重要生物学问题的重要工具。然而，基于其技术方面的一些局限，目前仍面临一定的挑战，主要包括分析速度、蛋白质组覆盖深度和定量的质量。糖基化蛋白质组学TMTpro 16plex标记试剂是Thermo Fisher Scientific新...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：去除样本高丰度蛋白的方法有哪些？我公司采一般用什么方式去除高丰度？ 发布时间：2023-08-28 12:25
- 部分样本（人的血液）可以通过去除高丰富蛋白的试剂盒Proteominer去除，通过标准SDS-PAGE验证去除效果；还可以通过跑胶检测，切除高丰度条带。但可能会滤掉部分的低丰度蛋白。我们公司一般采用与样本相对应的试剂盒来去除高丰度蛋白。...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：鉴定蛋白的“有和无”问题？ 发布时间：2023-08-28 12:25
- 一两次质谱实验无法做到准确的有或无的鉴定，有很多原因造成某个蛋白不检出，比如丰度较低，质谱采集的随机性等等，经过质谱广泛鉴定实验可以初步指示可能存在的有或无的蛋白差异可能性，后期需要多次质谱实验以及靶向质谱实验验证有或无的确定性。一般的定量蛋白质组学实验都是以共有蛋白为前提的，挑选不同样本间的差异表...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：磷酸化修饰的介绍、发生的位点、研究哪些方向会用到磷酸化？修饰蛋白组学分析中磷酸化修饰蛋白的富集方法有哪些，我公司用的是什么富集方法？ 发布时间：2023-08-28 12:24
- 磷酸化是一种常见的可逆的翻译后修饰，在细胞信号传导等众多的生物过程中发挥调节作用，修饰常常发生在S、T、Y位点上；研究信号转导、细胞周期、生长发育以及癌症机理等方向会用到；富集方法：TiO2富集，固相金属亲和色谱IMAC富集， pY-1000基序抗体富集我们公司采用具有顺磁特性的多孔琼脂糖 TiO2...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：全息扫描DIA与label free的优缺点分析？ 发布时间：2023-08-28 12:23
- 两者都可用于差异较大的样本（不同物种、不同组织部位），“有无”蛋白比较，不需要同位素标记，成本相对低；样本不受限制，应用范围广；LFQ确定是数据重复性稍差，缺失值较多；全息扫描DIA 的重现性较高，所有离子信息都能采集，缺点是需要预先建立数据库，数据分析较LFQ复杂...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：label-free分析的优点是什么？ 发布时间：2023-08-28 12:21
- 蛋白质非标记定量技术（ Label-Free ）是无需使用同位素标签的，只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据，比较不同样品中相应肽段的信号强度，从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。Label-Free的技术优势就在于蛋白质不需要进行标记，所需样品总量少，耗费低。无样本数量限制，但是建议多次（三...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：WB的原理是什么？ 发布时间：2023-08-28 12:20
- Western Blot采用的是聚丙烯酰胺疑胶电泳，待检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。SDS-PAGE可对蛋白质样品进行分离，转移到固相载体，例如硝酸纤维素薄膜（NC）上。固相载体可以吸附蛋白质，并保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。转移后的NC膜就称为一个印迹（blot...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：IP、co-IP、pulldown的区别是什么？ 发布时间：2023-08-28 12:20
- IP（免疫沉淀）：是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。co-IP（免疫共沉淀）：可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证，也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。Pulldown：带标签的诱饵蛋白能被特异结合该标签的固相亲和配基捕获，形成“次级亲和支持物”，用于纯化...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：SDS-PAGE的原理是什么 发布时间：2023-08-28 12:19
- SDS-聚丙烯酰胺胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS，SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使...... [全文]
- 「青莲百奥」蛋白组学FAQ：蛋白组学的定义？ 发布时间：2023-08-28 12:18
- 蛋白质组（Proteome）一词源于蛋白质（protein）与 基因组（genome）两个词的组合，意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。蛋白质组与转录组有许多相似之处，也具有时空特异性，会随着环境、组织或个体的改变而改变。...... [全文]