Cellometer K2 荧光细胞活力分析仪

简单的操作流程


60秒内即可完成自动细胞计数

Cellometer K2通过明场和荧光成像以及图像识别软件迅速准确地计数细胞，并自动计算和显示细胞数、浓度、直径和存活率%。

60秒内完成上样、图片查看、细胞计数、生成报告。

K2可以让用户：

• 增加通量

• 提高准确性

• 提高结果一致性

• 确保正确获取所有数据

• 分析不易计数的细胞（易成团，形状不规则等）

• 消除判断错误、误数和使用者之间的差异

原代细胞分析：PBMCs, 肝细胞和其他

Cellometer K2专为原代样本分析而设计，适用样本包括外周血、脐带血、骨髓，以及其他复杂样本：

• 移植用有核细胞

• 免疫研究中的PBMCs

• 疫苗开发中的脾细胞

• 细胞治疗中的干细胞

• 肿瘤研究中的肿瘤悬液

通过将活的和死的有核细胞染上不同荧光，排除细胞碎片、血小板和红细胞的干扰，K2可精确计算细胞存活率。基于对“复杂”和“干净”样本的精确分析，K2可胜任在细胞处理的多个阶段（细胞收集 – 分离 – 冻存）对细胞状态进行评估。

Cellometer K2可用于分析多种细胞类型，包括：

双荧光染色法计数活/死有核细胞

为什么用双荧光染色法？

仅凭明场下的细胞形态有核和无核细胞难以被区分，而且台盼蓝染色也没有荧光染色对活死细胞的判断灵敏，所以我们强烈建议用双荧光染色法来精确分析原代细胞。K2细胞计数仪预设了多种用AO/PI双荧光染色法来分析原代细胞的应用。

AO/PI染色法

吖啶橙(AO)是一种核酸染料，可以渗透活细胞和死细胞，将所有有核细胞染色并发出绿色荧光。碘化丙啶(PI)只能渗透破损的细胞膜，将所有有核的死细胞染色并发出红色荧光。当细胞被AO和PI同时染色时，由于这两种染料间的荧光共振能量转移(FRET)，所有活的有核细胞会发出绿色荧光，所有死的有核细胞会发出红色荧光。不含核的细胞或杂质不发荧光。

细胞实验：细胞周期、凋亡和GFP

Cellometer K2可以完成多种细胞实验，比如细胞周期、凋亡和GFP蛋白表达分析。K2的数据可以导出到De Novo FCS Express流式软件进行分析和展示。

用户可以用Nexcelom Bioscience的细胞周期试剂盒对细胞进行染色并分析SubG1, G0/G1, S和G2/M等期所占的比例。用户也可以用Nexcelom Bioscience的Annexin V-FITC/PI和Caspase 3/8试剂盒来分析凋亡细胞的比例。K2还可以分析表达GFP的细胞所占的比例。



 

排除红细胞、血小板或细胞碎片的干扰

AO和PI均是核酸染料。因为大部分成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核，所以只有活的和死的有核细胞才会被染色发出荧光。该方法不需裂解红细胞，能帮助用户节省时间和减少实验步骤。红细胞、血小板和细胞碎片都会在计数时被排除。

荧光染色法计数原代细胞的优势

右边的细胞图片显示了荧光染色法计数原代细胞的优势。明场图片显示了该样本中的有核细胞以及混杂的红细胞和血小板。不过在红色和绿色荧光通道中我们只能看到有核的活/死细胞。


 

细胞图像可用于数据确认

没有完全相同的两个细胞

用户可通过K2的明场通道查看细胞的形态。

被圈定的细胞图片可用于确认图片的获取和分析是否正确。明场图片可用于普通细胞计数和台盼蓝存活率分析。

被圈定的荧光图片显示被计数的有核活/死细胞，可用于确认原代细胞的分析是否准确。

用户可确认：

• 基于大小和形态判断细胞计数是否准确

• 成团细胞计数是否精确

• 红细胞、血小板、碎片是否被排除

明场图片可用于确认粘连的细胞是否都被计数以及碎片是否被排除。在荧光图片中，被计数的活细胞用绿圈标出，被计数的死细胞用红圈标出。

• 细胞图片可被保存和导出并用作文献发表和演示

• 保存的图片可以用默认或自定义参数重新分析

Cellometer分析原代肝细胞的方法

因为肝细胞的形态不均一、脆弱、易成团，用血球计数板人工计数肝细胞耗费精力且不准确。而且肝细胞的存活率下降很快，如果计数时间太长会导致结果的不准确和不一致。除此以外，肝细胞的质地很脆弱，不能承受鞘液的压力，所以也不适合用流式细胞仪分析。因此，Cellometer图像细胞仪是肝细胞分析的最佳仪器。

双荧光染色步骤

分析存活率时，将20 µl肝细胞样本和20 µl Cellometer AO/PI染料混合。吖啶橙(AO)与DNA结合发出绿色荧光，将肝细胞和碎片区分开。碘化丙啶(PI)只能渗透破损的细胞膜，和死细胞的DNA结合发出红色荧光。当细胞同时被AO和PI染色时，由于FRET (荧光共振能量转移)效应，死细胞中AO发出的绿色荧光被PI吸收，所以死的肝细胞发出红色荧光，活的肝细胞发出绿色荧光。这个染色过程简单、快速，结果准确。

Cellomter分析

和染料混合后立即将20 µl染色的样本加入Cellometer细胞计数板并插入Cellometer K2计数仪，仪器会对板中的细胞自动拍照并计数。因为计数板是一次性的，所以不需清洗，也降低了交叉污染的风险。用户可用预设的原代肝细胞参数分析样本。


 

成团细胞和形状不规则细胞的分析

NCI-60 细胞系和成团的MCF-7细胞

NCI-60是美国国立卫生研究院(NIH)为药物筛选开发出的59株(原本60株)细胞系。

• NCI-60系列中有57%的细胞系易成团，含有碎片，或形状和大小有较大差异

• 所有59株NCI-60细胞系都在Cellometer细胞计数仪上验证过

美国国立癌症研究院(NCI)的所有40所癌症中心都在使用Cellometer细胞计数仪

 

细胞大小分析和基于大小的细胞计数

Cellometer K2细胞计数仪会基于细胞直径自动生成细胞大小直方图。

因为Cellometer可生成单个细胞大小的测量结果，所以可将多个样本叠加在一个直方图上，以便分析细胞直径随时间的变化。
 

比人工计数快10倍

使用血球计数板人工计数1 x 10⁶个细胞需要花费大约5分钟的时间。同时计数活细胞和死细胞所需时间会在此基础上加倍。Cellometer Auto 2000可以在30秒内得到活细胞和死细胞的数目和浓度以及存活率百分比。

提高数据准确性和一致性

• 省略清洗步骤

• 减少判断错误

• 排除红细胞的干扰

• 避免记录和计算错误

• 减少计数时间，提高工作效率

Cellomter准确性

Cellometer K2拥有优越的可重复性，荧光计数和分析结果的CV%都在10%以内。右边数据显示的是用PI染色后的Jurkat细胞的计数和存活率结果。

一次性计数板：无需清洗、无污染

Cellometer一次性细胞计数板由两个厚度一定的小室组成，利用标准的单通道移液器将20 µl细胞悬液注入小室内，再将细胞计数板插入到Cellometer计数仪后板内的细胞即可以直接被拍照显示。

一次性细胞计数板的优点：

• 节省时间 – 无需清洗

• 无交叉污染的风险

• 降低了对用户的生物危害风险

• 样品体积可控

• 针对大细胞有更深更宽的计数板

• 最为实惠的自动细胞计数仪耗材

专业的在线和现场技术应用支持

经验丰富的Nexcelom技术支持专家可在北京时间上午9点至下午5点提供电话和在线支持，并可协助：

• 创建新的细胞类型

• 计数参数的优化

• 故障排除

• 培训新用户

• Cellometer K2新仪器装机

Cellometer K2软件界面右下角的帮助按钮可让用户直接访问：

• 软件功能和说明书

• 在线教程和培训视频

• 提交技术支持申请

所有的Nexcelom应用科学家都100％专注于基于成像原理的细胞计数方法和实验应用。

Nexcelom应用科学家可以支持：

• 现场演示

• 培训

• 故障排除

• 技术研讨会

Cellometer K2 荧光细胞活力分析仪信息由耐细隆生物仪器（上海）有限公司为您提供，如您想了解更多关于Cellometer K2 荧光细胞活力分析仪报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途