HIV疫苗蛋白多参数制剂开发

方案标题： HIV疫苗蛋白多参数制剂开发

检测样品：HIV-1疫苗重组蛋白BG505-SOSIP

检测项目：HIV-1疫苗重组蛋白制剂开发

应用领域： 制药

方案摘要：

据某CDMO公司统计，有约60%的公司遭遇过制剂开发问题导致的项目延迟甚至失败，尽早启动制剂开发能够帮助企业降低药物研发风险。2bind公司借助NanoTemper的PR Panta完成了HIV-1疫苗BG505-SOSIP的制剂开发。

方案详情:

2bind公司的研究人员联合其生产的FORMOscreen® buffer筛选试剂盒与PR Panta寻找能够提升HIV-1疫苗BG505-SOSIP热稳定性，均一性及耐受性的制剂条件。研究人员首先检测BG505-SOSIP在96中buffer中的解链温度。同BG505-SOSIP在PBS中的Tm（65.7℃）相比， buffer 9中其Tm增加了6.8℃，而buffer 16中Tm降低了10.5℃（表1）。

接下来研究人员通过PR Panta的DLS模块测定了Tm排序前10和后10样品的流体力学半径和多分散性指数PDI（表1）。buffer 9中Tm最高，但其流体力学半径和标准偏差都是Tm排序前10中最大的， PDI为0.28表明样品是不均一的(PDI＜0.1表示样品高度均一，0.1＜PDI＜0.25表示样品均一性较好，PDI＞0.25表明样品不均一，出现聚集）。buffer 57的Tm比buffer 9低2.25℃，但buffer 57的流体力学半径为7.18nm，PDI仅有0.09，表明样品高度均一。因此，buffer 57是目前最佳的制剂条件。

表1. Top 10和Bottom 10 buffer中Tm及DLS参数

为了进一步了解buffer 57对BG505-SOSIP长期稳定性的影响，研究人员开展了加速降解实验，包括：（1）25，40，60℃放置14天。（2）过氧化氢处理下25，40，60℃放置14天。（3）振荡及冻融。

25、40℃包括加入过氧化氢放置14天后，BG505-SOSIP的流体力学半径及PDI均无明显变化。仅在60℃放置14天后流体力学半径增加一倍，PDI增加至0.3，表明部分样品发生了去折叠（图1A，B）。振荡20min以及5次冻融均未造成影响（图1C）。结果表明buffer 57非常适合BG505-SOSIP的长期存储。

图1. BG505-SOSIP 加速降解实验DLS检测结果

PR Panta仅需少量样品即可快速完成制剂开发：您可以先通过Tm，Tturbidity进行初筛，缩小制剂范围。随后通过DLS检测选取合适的缓冲液并开展加速降解实验（表2），极大提升了制剂开发效率，降低成本。

表2. PR Panta制剂筛选消耗样品量及时间