MALDI-TOF MS定量的新证据来了：糖化血红蛋白定量高于NGSP要求

近日，北京大学深圳医院检验科纪玲博士团队，对融智生物新一代宽谱定量飞行时间质谱系统QuanTOF测定HbA1c的分析性能做了系统评价。实验结果显示，批内CV和总CV分别低于1.6％和2.4％，且线性度良好，相关系数为0.999。另外，质谱仪强大的分辨能力，可有效对同时患有异常血红蛋白病的个体进行准确诊断，抗干扰能力优异。相关结果已经发表在Clinica Chimica Acta上，论文题为“Evaluation of MALDI-TOF MS for the measurement of glycated hemoglobin”，（https://doi.org/10.1016/j.cca.2019.08.025）。

融智生物新一代宽谱定量飞行时间质谱QuanTOF

以下是该研究的相关内容：

糖化血红蛋白（HbA1c）是葡萄糖与β链N端缬氨酸共价键连接的一种修饰血红蛋白，被广泛用作监测糖尿病患者长期血糖控制水平以及糖尿病筛查和诊断的重要标志物。因此，保证HbA1c检测方法的检测质量具有十分重要的意义。

目前，HbA1c定量常用方法有阳离子交换高压液相色谱法、亲和色谱法（HPLC）、毛细管电泳法（CE）以及免疫反应法，每种技术都有其独特的特点和性能。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）先前被用于精确测量α和β珠蛋白链的分子量，以识别潜在的血红蛋白变体，以及修饰的物种，如糖化珠蛋白。

与液相色谱-质谱（LC-MS）相比，MALDI-TOF MS具有检测成本低、样品制备简单、分析程序简单等优点。随着现代MALDI-TOF MS技术的发展，它越来越适用于HbA1c的常规定量测定。虽然基于MALDI-TOF MS技术的HbA1c定量方法已经见诸报道，但是据了解，MALDI-TOF MS还没有用于实验室常规定量HbA1c，而且，对MALDI-TOF MS测定HbA1c的系统评价也没有报道。

在此项研究中，研究人员评估了QuanTOF系统用于HbA1c分析的性能，包括不精确度、精确度、线性，此外还与HPLC法和CE法进行了比较，探讨了α-珠蛋白和β-珠蛋白之间糖化率的相关性，以及HbA1c分析中最常见的分析干扰的影响，部分结果如下所示：

表： QuanTOF检测HbA1c的性能表征

对于QuanTOF不精确度的测量，批内CV和总CV分别低于1.6％和2.4％（NGSP单位）。对于QuanTOF精确度研究，测量的HbA1c值与相应的IFCC目标值之间的绝对差异≤0.2％。线性度良好，相关系数为0.999。另外，QuanTOF检测HbA1c的结果与HPLC法和CE法的检测结果有很好的相关性，α-珠蛋白和β-珠蛋白的糖化率之间存在良好的相关性。

表：QuanTOF检测HbA1c常见干扰影响研究

QuanTOF不易受到常见干扰影响，这些干扰因素包括胆红素、甘油三酯、不稳定A1C和氨基甲酰化血红蛋白。然而，当HbF量大于约8.0%或存在HbS时，观察到不可接受的正偏差。

总之，该研究显示，QuanTOF检测HbA1c在精密度、准确度、线性等方面均显示出良好的分析性能，与其他常用方法有良好的相关性，而且，不易受到最常见的分析干扰影响。与传统的CE、HPLC等方法相比，QuanTOF具有成本低、扫描速度快等优点。此外，QuanTOF 还提供了更多关于α-珠蛋白糖化率的信息，这可能为血红蛋白变异的HbA1c分析提供更多的潜在应用。