两大质谱法相结合 揭示犬口腔肿瘤新候选蛋白标记

随着人民生活水平的提升，养犬的数量也逐年增加。喂食、生活环境等的变化，使得肿瘤成为老年犬最主要的致死原因。包括高侵袭性和转移性口腔黑色素瘤（OM），非扁桃体口腔鳞状细胞癌（OSCC）和良性肿瘤（BN）在内的口腔肿瘤，是犬类的常见肿瘤。尽管这些肿瘤表现不同，但相关证据已显示出其蛋白质表达谱的有限数据，特别是在蛋白质组水平。

泰国朱拉隆功大学的研究人员使用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）两种方法，对犬类常见的口腔肿瘤进行了蛋白组学的研究，表征了肽质量指纹（PMFs），并鉴定OM、OSCC、BN和正常对照受试者的潜在蛋白质候选物，以寻找化疗药物与疾病扰乱的蛋白质之间的关系。

黑色素瘤 (A)、羊膜黑色素瘤 (B)、分化良好的鳞状细胞癌 (C)、分化不良的鳞状细胞癌 (D)、上皮细胞癌 (E) 和成釉细胞瘤 (F) 的组织病理学特征。

研究结果显示，每个样本组都有一个独特的聚类，以及具有特定蛋白质候选物的独特肽质量指纹（PMFs）。在早期口腔黑色素瘤（OM）中观察到在囊蛋白分子伴侣（SACS）的2,274Da处的独特肽片段，而在早期和晚期OM中呈现了钠电压-门控通道α亚基10（SCN10A）的1,958Da处的片段。Notch1的2,316Da处的肽质量出现在早期OM和良性口腔肿瘤中，而肽质量2,505Da的谷氨酸离子型受体N-甲基-D-天冬氨酸型亚基3A（GRIN3A）在所有组中都被鉴定出来。GeLC-MS/MS的标记表达蛋白包括: 良性肿瘤中含有1C (JMJD1C) 的Jumonji, OM中的传代素 (INVS) 和 rho 鸟嘌呤核苷酸交换因子 28 (ARHGEF28)，OSCC中的BTB结构域16（BTBD16），以及所有癌症组的蛋白酪氨酸磷酸酶非受体1型（PTPN1）、BRCA2、DNA修复相关（BRCA2）、WW域结合蛋白2（WBP2）、嘌呤能受体P2Y1和蛋白酶体激活子亚基4（PSME4）。

研究还证实了这些蛋白质与化疗药物顺铂和阿霉素、环磷酰胺和吡罗昔康之间的网络连接。总之，这项研究揭示了犬口腔肿瘤的独特肽质量指纹（PMFs）和新候选蛋白标记。对于未来的工作，研究人员表示，疾病中的蛋白质-蛋白质相互作用则应通过高通量方法确认，例如酵母双杂交筛选和亲和纯化与质谱联用。

 在生命科学领域，随着分子生物学、蛋白质组学、代谢组学等学科的飞速发展，越来越多的生物标志物与疾病间的关系逐渐被建立和明确，这将十分有利于疾病的发现与治疗。当然，对于犬类等动物来说也不例外，虽然目前生物标志物的研究还比较少地聚焦在动物身上。无论如何，生物标志物的定性和定量分析，在临床上可以作为重要的辅助诊断手段。

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