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基因治疗:创新多重技术组合,严控腺相关病毒(AAV)质量

发布时间: 2020-04-24 14:58 来源:普诺森生物科技(上海)有限公司ProteinSimple

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基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病,从而达到治疗目的。所有基因疗法都利用病毒或非病毒载体将DNA或RNA输送到宿主细胞中。与非病毒载体(如阳离子脂质或化学载体)相比,病毒载体感染宿主细胞的效率更高,但同时它们可能具有免疫原性副作用。因此,在开发药物时,选择合适的病毒载体是至关重要的组成部分。腺病毒相关病毒(Adenovirus Associated Virus,AAV)AAV是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染。腺相关病毒(AAV)作为一种安全有效的载体,目前已应用于多个临床试验。

在AAV生产过程中,使用SDS-PAGE通过Western Blot来鉴定蛋白。然而,传统的Western Blot手动操作繁琐,重复性差,并且仅是半定量,不宜用于工业产品质量控制。Wes全自动定量western以其独特优势逐渐替换传统western blot,可用于新型AAV衣壳的表达到下游制造全程质量控制中。与所有治疗药物一样,基因疗法,需要表征包装药物的递送载体电荷等。使用全柱成像毛细管等电聚焦电泳法(icIEF)来表征AAV的电荷异质性,可以确保产品的稳定性和一致性。Maurice兼具CE-SDS和iCIEF双功能。

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