蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting)，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的母的蛋白的方法。该方法包括三个部分：   SDS-PAGE凝胶电泳，蛋白质的电泳转移，免疫印迹分析。由于免疫印迹具有SDS-PAGE 的高分辨力和免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白质分析领域的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定目的蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。

操作步骤

1. 获取细胞或组织裂解物

2. 蛋白质定量

常用的蛋白定量方法：Bradford assay, Lowry assay 或BCA assay。定量后，可根据情况将标本保存在-20°C /-80°C备用，或者直接进行电泳分离蛋白。

3. 电泳分离蛋白质

4．转膜

根据不同的检测目的和待测蛋白的特性,选择合适的膜类型。常用的转移膜类型有:PVDF膜、***纤维素膜（NC膜）和尼龙膜，其中PVDF和NC膜的使用频率zei高。

5．封闭

去掉膜上多余的非特异性结合位点，降低背景。常用的封闭溶液有：含BSA或者脱脂奶粉的TBST或TBS。

6．孵育一抗

一抗的选择成功与否，是整个WB实验成功的关键。

7. 孵育二抗

根据说明书推荐浓度使用TBST稀释一抗。如果说明书没有推荐浓度，可进行多个稀释比例进行摸索zei佳稀释度（1:1000-1:20000）。孵育条件一般为室温1-2小时。

8. 底物孵育

选择显色或者化学发光底物。一般倾向于化学发光，灵敏度高且背景低，节省抗体用量。

9．结果分析和检测

凝胶成像系统检测或者暗室曝光到胶片。

客户提供

1.足够量的生物样品，有具体要求请事先说明；

2.适合的一抗，如需我们采购请事先说明；

3.相关背景资料等。

服务期限

    7个工作日。

我们提供

全套实验方法、一般实验试剂和实验报告。

质量保证 

我们的质控部门保证所提供的实验结果真实客观有效。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途