中药安全性控制：中药材中桔青霉素的检测方案

桔青霉素是青霉属、曲霉属、红曲霉属中的丝状霉菌代谢产生的一种真菌毒素，有研究表明，桔青霉素可造成人和动物肾脏、肝脏、肠道和生殖系统的损伤，甚至还可以导致畸形、肿瘤，诱发突变^[1,2,3]。《中国药典》9305中药中真菌毒素测定指导 原则（第一次）征求稿^[4]中提到中药材在种植、加工、储存及流通等过程中存在被真菌及其产生的毒素污染的风险，为实现对中药中真菌毒素的准确测定，制定本指导原则。除已收录入2020年版《中国药典》2351真菌毒素测定法中的7类11种真菌毒素测定法外，该指导原则其中一项，增订桔青毒素高效液相色谱法与液相色谱串联-质谱法两种检测方法。

SCIEX已针对桔青毒素高效液相串联质谱法建立液质方法和前处理方法，为中药中桔青毒素检测提供参考。

实验方法特点及优势

• 本方法采用SCIEX Triple Quad^™ 5500+系统，采用桔青霉素免疫亲和柱对中药进行前处理，结合Phenomenex Luna Omega Polar C18色谱柱，建立8 min 色谱梯度，实现高通量定量分析。满足药典对回收率的要求；不同浓度回收率结果一致，且仪器的重复性好；前处理流程简单易操作。

图1. ExionLC^™ 2.0系统和本土化SCIEX LC-MS/MS系统

空白溶剂中两个MRM离子通道均无干扰，方法专属性好，特异性高，仪器灵敏度高。该色谱条件下，色谱峰峰形良好。

图2. 典型色谱图（从左到右，分别为空白溶剂、0.02 ng/mL和20 ng/mL基质加标样品；上、下两张谱图分别为定量和定性离子对通道）

不同浓度的峰面积及线性回归方程见图3：0.02 ~20 ng/mL的浓度范围内，该方法线性关系良好

图3. 标准曲线和线性回归方程，线性相关系数 0.9998

• 6 针样品 (图4) 连续采集，精密度（RSD）远满足方法学中对重复性要求，仪器和方法的重现性好。

• 三个不同浓度的提取回收率在91-105%之间，9份提取回收率结果RSD为5.30%，不同浓度的提取回收率结果基本一致，且满足方法学要求。

结论

本方法采用桔青霉素免疫亲和柱对中药中的桔青霉素进行提取，使用本土化SCIEX Triple Quad^™ 5500+系统进行定量。

• 该方法中空白溶剂无干扰，专属性好，特异性高；

• 仪器灵敏度高；

• 线性范围宽，线性关系良好；

• 仪器和方法的重现性和稳定性好； 

• 8分钟梯度方法，检测通量高。

• 前处理流程简单，易操作。

该方案中包含的液质条件和前处理方法，为中药中桔青霉素的定量提供参考。