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基于SDS-PAGE的蛋白分离

参考报价: 面议 型号: 基于SDS-PAGE的蛋白分离
品牌: 百泰派克 产地: 北京
关注度: 15 信息完整度:
样本: 典型用户: 暂无
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十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)在蛋白表达分析等科研工作中经常用到。可用于获取蛋白质样品的电泳图谱,结合其它基于质谱的蛋白质鉴定服务对样品进行分析或纯化,用于复杂生物样品的蛋白质谱分析。

百泰派克生物科技可根据您的需求,提供基于1D SDS-PAGE或2D SDS-PAGE的蛋白分离服务:基于我司优化的标准操作流程,使用Bio-Rad Mini-PROTEAN® Tetra凝胶系统进行1D SDS-PAGE蛋白质分离。将蛋白样品(5-20ug)用上样缓冲液稀释到一定浓度并加热(沸水浴5 min),根据样品的分析目的选择适当浓度的凝胶并将样品上样到凝胶孔中,加入电泳缓冲液,首先在80V电压下恒压分离15min,然后在120V电压下恒压分离60 min。分离后卸下胶板,将凝胶用考马斯亮蓝染色或银染染色。

2D SDS-PAGE蛋白分离使用IPG(pH 3-10)胶进行一维等电点聚焦,SDS-PAGE胶二维电泳进行Mw分离,实现蛋白分离。样品首先使用超滤管进行纯化,并将溶液体系替换为2D lysis buffer (30 mM Tris- HCl, pH 8.8, containing 7 M urea, 2 M thiourea and 4% CHAPS)进行等电点聚焦。聚焦好的胶条胶面朝上放在干的厚滤纸上,挤去多余水分、矿物油及多余样品,用缓冲液溶胀15 min后,将胶条继续在平衡缓冲液中平衡15 min。将胶条胶面朝上放在凝胶的长玻璃板上,使用低熔点琼脂糖封胶后,将凝胶转移至电泳槽中,起始使用低电压,待样品在完全走出IPG胶条,浓缩成一条线后,加大电压,待溴酚蓝指示剂达到底部边缘时即可停止电泳。卸下胶板,将凝胶用考马斯亮蓝染色、银染染色或荧光染色。使用Typhoon TRIO (GE Healthcare)对胶图进行扫描,扫描得到的胶图通过Image Quant software (version 6.0, GE Healthcare)和DeCyder 5.0 (GE Healthcare)进行分析。

百泰派克2D SDS-PAGE示例
百泰派克2D SDS-PAGE示例

关于样品:

1. 液体或固体样品均可。
2. 1D SDS-PAGE一般需要2-30µg蛋白,2D SDS-PAGE一般需要50-1000µg蛋白。
3. 考马斯亮蓝染色、银染染色或荧光染色的蛋白质均可。


基于SDS-PAGE的蛋白分离信息由北京百泰派克生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于基于SDS-PAGE的蛋白分离报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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