利⽤MaxPeak⾼性能表⾯提⾼三羧酸循环相关分析物的分离效果和回收率

简介 

三羧酸(TCA)循环⼜称为克雷布斯循环或柠檬酸循环，是新陈代谢的最终归宿，其中碳⽔化合物、蛋⽩质和脂 肪分解形成⼄酰辅酶A或其他分⼦1。 这些分⼦随后经酶氧化⽣成诸如三磷酸腺苷(ATP)等分⼦，为细胞⽣⻓和 作⽤提供能量，并减少有助于其他代谢过程的重要辅因⼦1。 此外，TCA循环会产⽣氨基酸、蛋⽩质、脂肪酸 、胆固醇和核苷酸合成的前体，从⽽促进细胞⽣⻓和分裂2。 

由于重要的代谢过程和途径涉及TCA循环，因此需要研究分析物上调和下调的变化以及它们如何使⼈们对疾病 状态和细胞过程产⽣新的认识3。 TCA循环的组分为⼩分⼦极性羧酸，因此在传统的反相液相⾊谱条件下难以 保留。⽬前⽤于分析这些化合物的液相⾊谱⽅法包括：HILIC4、离⼦对5、阴离⼦交换6以及衍⽣化结合⽓相7 或液相⾊谱8。虽然每种⽅法都具有相应的挑战，但⾦属表⾯还可能导致问题进⼀步复杂化。已知含有富电⼦ 基团的化合物（例如羧酸盐和磷酸盐）会与⾦属螯合，尤其是铁9。 

本⽂介绍⼀种能够兼容MS的混合模式液相⾊谱⽅法，⽤于分析TCA循环分析物以及其他相关化合物，⽆需进 ⾏样品衍⽣化或使⽤离⼦对试剂。该⽅法结合采⽤有机-⽆机杂化表⾯技术（MaxPeak⾼性能表⾯(HPS)）的 ⾊谱柱，以减轻分析物与⾦属表⾯的相互作⽤。本研究使⽤该⽅法分析健康受试者和乳腺癌受试者的尿样。使 ⽤统计软件⼯具进⼀步确定这些样品中存在的分析物及其上调和下调的任何差异。