使用超高效合相色谱 (UPC 2 ) 分析人体尿液中的三环类抗抑郁药

简介 

三环类抗抑郁药（TCA）是较老的一类药物，但仍具有药理学作用。例 如，对其它类抗抑郁药反应较差的药物受试者仍较常见，由此决定了 TCA仍具有持续的生存空间。此外，这类药物比其它新型的抗抑郁药 要便宜得多，因此在门诊中也有使用。过去，人们使用GC、1 UV、2 或 LC/MS对TCA进行分析。3 UPC 2TM 技术可对有机提取物进行分析，因此在 生物分析测定领域备受青睐。有机提取物可通过此领域中最常见的样 品制备方法，例如蛋白质沉淀（PPT）、液-液萃取（LLE）和固相萃取 （SPE）法获得。反相色谱系统在进样前需对有机提取物进行蒸发和复 溶，而非水溶剂系统则不需要此环节。UPC 2 技术具有主要溶剂（CO2） 环保、可再生、可与反相色谱进行正交实验、以及可利用多种固定相 的特点，使其具备了低溶剂消耗和低成本的优势，从而增加了生物分 析方法开发的选择性和灵活性。因此，本实验以人体尿液中TCA的分析 为例，进行了一项确证UPC 2 分离适用性的论证性研究。研究中所用特 定TCA的结构见图1。虽然人们对GC和LC方法开发途径有很好的定义并在 常规应用中使用，但UPC 2 分离的方法开发仍是一块较新的研究领域。 本应用纪要中重点描述了某些关键的UPC 2 参数并提供了适用的筛选选 项。例如，色谱柱化学性质、pH和进样溶剂由色谱柱管理器和四元溶 剂切换系统进行系统化的自动筛选。在选择色谱柱、流动相和进样溶 剂后，系统将使用通过筛选试验获得的最佳条件对梯度进行优化并分 析尿样提取物。在尿液检测中，各抗抑郁药的定量下限（LLOQ）0.1 ng/mL可轻松达到，符合FDA针对生物分析方法制定的LLOQ测定标准。另 外，简化的标准曲线（无内标物）在+/-1%至8%范围内的线性和准确度 良好。