运用ACQUITY Arc可靠地对肽图分析方法进行转换

ACQUITY Arc系统能够在同一个平台上运行HPLC和UHPLC分离，是一款可 以填补HPLC与UPLC®之间的性能差距的LC平台。利用Arc Multi-flow path™技 术，用户可在流路1与流路2之间轻松切换，从而实现无缝的方法转换 或改善现有方法。此前的研究表明，ACQUITY Arc系统能够轻松转换单 克隆抗体的SEC-HPLC方法1 以及CEX-HPLC方法2 。这两项研究均采用流路1来 模拟HPLC分离，而且两次分析的结果表明系统之间的相对保留时间、 峰面积百分比和分离度几乎相同。本应用纪要的目的是展示不同LC平 台之间进行肽图分析方法转换的等效性。 

肽图分析已成为生物制药行业的一项常规分析，通常采用平台检测的 方式进行。肽图可用于表征蛋白质的氨基酸序列，从而对蛋白质进行 鉴定以及表征翻译后修饰。在产品的商业转化过程中，肽图常被用于 批释放测试或在鉴定完成后用于基因稳定性检测3 。肽图并不是一种通 用的方法，分析人员必须针对特定的目标蛋白质专门开发分析方法4 。 为了获得高重现性的肽图，每种分析方法都必须考虑酶解和分离因素， 只有这样才能准确评估鉴定结果以及与稳定性、安全性和有效性相关 的关键质量属性(CQA)。 

由于为特定的蛋白质建立肽图有一定的难度，本应用纪要将一个60分 钟的通用平台方法从Agilent 1100系列HPLC转换至ACQUITY Arc系统，并 对方法转换过程进行了评估。然后，在两款不同的ACQUITY Arc系统上 应用该方法，通过对比所得的结果评估系统之间的差异性。最后，除 光学检测技术之外，我们还使用ACQUITY QDa质谱检测器演示了如何将 质谱检测技术应用于这类分析。