Matthew A. Lauber, Stephan M. Koza, 和 Kenneth J. Fountain

目的

展示GlycoWorks工作流程的各方面优势，包括在方法验证和故障排除中适用于不同SPE型式的灵活性以及所采用的人IgG对照标准品的可行性。

背景

蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻译后修饰，可以调节蛋白质的结构和功能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是必须进行彻底表征与监测的结构特征，尤其是在多聚糖图谱的变化与疗效和/或免疫原性的变化相关时。

一套用于评价糖蛋白中N-糖的常规应用方法包括：通过PNGase F释放出多聚糖，采用具有荧光活性的2-氨基苯甲酰胺(2-AB)进行标记，然后采用亲水作用色谱法(HILIC)进行分离，最后由荧光检测器(FLR)进行检测(图1)。此工作流程中，比较复杂的是样品制备步骤。为使此过程更加直观，沃特世推出了GlycoWorks，将N-糖制备与分析所需的诸多耗材组合在一起。最值得注意的是，GlycoWorks实现了HILIC SPE的前/后标记纯化步骤，这对于确保方法的稳定性而言非常重要。

GlycoWorks可帮助制备出N-糖用于后续分析，并为方法确认和故障排除提供不同的SPE型式(低/高通量)以及IgG对照标准品。