Dominic Helm¹、Christopher J. Hughes²、James I. Langridge²、Keith Richardson²、Arkadiusz Grzyb²、Jason Wildgoose² 和 Bernhard Kuster¹

¹慕尼黑理工大学 （德国弗赖辛） ²沃特世公司 （英国曼彻斯特）

应用优势

  ■ 肽精确定量

  ■ 更低的检测限和定量限

  ■ 完全的产物离子覆盖范围，不会发生工作周期损失

  ■ 简化方法开发

简介

近来，基于靶向LC/MS的方法被应用于定量蛋白组学中，以利于实现高准确度的多重相对和绝对定量研究。在研究中，三重四极杆和高分辨率质谱仪均有使用。使用这两种仪器不是完整蛋白质直接定量，而是监测蛋白被酶解后产生的一定量的一种或多种特征肽作为替代。

通常，为了进行绝对定量需要在样品中加入特定含量的标准稳定同位素标记肽。基于三重四极杆的SRM/MRM检测的关键优势在于其灵敏度、采集速度和线性动态范围。

但是，SRM/MRM肽定量的特异性常受到质疑，从而促进了高分辨率精确质量数仪器在肽定量中的应用。本文中证实了SYNAPT G2-Si系统在蛋白质和肽定量中的优势，采用一种全新的High Definition MRM  (HD-MRM)模式，其中在四极杆飞行时间质谱仪中以MS/MS模式使用T-Wave离子淌度分离，可在一次采集中提供高灵敏度和选择性的定量检测，并且肽分子离子的所有产物离子均具有最大响应。