使用表面带电杂化(CSH)C18色谱柱提高反相肽分离的峰容量

发布时间： 2013-06-13 21:05 来源：沃特世科技（上海）有限公司

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使用表面带电杂化(CSH)C₁₈色谱柱提高反相肽分离的峰容量

Matthew A. Lauber, Stephan M. Koza, 和 Kenneth J. Fountain

沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)

引言

无论是通过自上而下的蛋白质组学对蛋白质进行研究¹还是运用肽图表征生物药物²，肽分离技术都极其重要。这些分析中所遇到的混合物均具有内在的复杂性。因反相(RP)色谱法具有较高的分辨率，并且能够轻松地与质谱法(MS)衔接，它已成为首选的分离方法。与梯度反相色谱关系最紧密的性能指标是峰容量，或在梯度时间内的最大峰数量³。有趣的是，除使用较小的填料颗粒外，对固定相进行化学修饰也可以对峰容量产生显著的影响。例如，表面带电杂化(CSHTM)C18色谱柱的化学特性是对亚乙基桥杂化(BEH)C18固定相的改进⁴，因为除了C₁₈键合相外，其表面经修饰后还带有低水平的正电荷5。业已表明，这种修饰能够改善离子化小分子的峰形、载量行为和峰容量^5-10。

在本研究中，我们评估了CSH130 C₁₈的肽分离特性，期望能够在色谱性方面得到相似的改善，因为在常用的酸性条件下，大部分肽都带有正电荷。针对肽所做的研究表明，与肽分析中先进的固定相相比，这种新型的固定相能够具有更大的峰容量、独一无二的选择性，并且对MS信号的依赖性更低。

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