利用Xevo TQ-S增加低暴露量化合物的生物分析灵敏度

应用优势

这款新型的串联四极杆质谱系统大大增加了低浓度组织样品的药物化合物分析的灵敏度。

沃特世解决方案

Xevo™ TQ-S

MassLynx™与TargetLynx™的联合使用

ACQUITY UPLC®

ACQUITY UPLC BEH色谱柱化学品

关键词

StepWave™、T-Wave,™ 生物分析、药物化合物、丙酸氟替卡松、沙美特罗琥珀酸盐

简介

对生物体液中的药物进行准确定量有助于准确测定药物的药代动力学参数。低暴露量组织样品中的化合物(如：吸入型药品或强代谢型药品)需要灵敏度非常高的分析，才可准确地确定药代动力学曲线的消除相。这对于现代的LC/MS/MS仪器灵敏度而言无疑是个挑战。

Xevo TQ-S是一款超高灵敏度的串联四极杆质谱仪。它具备以创新离轴离子源设计为特色的StepWave离子传输技术。这项设计显著提高了从离子源到四极杆分析器的离子传输效率，同时其离轴离子通路还可将中性污染物排除。这两个特点的结合大幅度增加了LC/MS/MS系统的灵敏度。

实验

色谱条件

液相色谱(LC)系统： ACQUITY UPLC(二元溶剂管理系统、样品管理器、HT色谱柱恒温箱)

液相色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18柱，1.7微米，2.1 × 50毫米

梯度： A：0.1% 氨水(Aq)B：甲醇5 ~ 95%B洗脱1.5分钟以上

流速： 600 微升/分钟

进样量： 10 微升

质谱条件

质谱系统： Xevo TQ-S和Xevo TQ于电喷雾正离子模式下操作

MRM数据采集： 501 => 292.95 氟替卡松

416.15 => 380 沙美特罗

电压： 每个质谱仪及锥孔气流的毛细管、锥孔和碰撞电压都进行了最优化

源温度： 140 °C

脱溶剂温度： 625 °C

喷雾气体流量： 1200升/小时

结果和讨论

       凭借从背景噪声中对目标峰的识别能力，对生物体液中的药物化合物进行精确定量。Xevo TQ-S中的StepWave源专为优化这项功能而设计。它包括两个差分抽取的离子传输阶段;两个阶段均启用了T-Wave1技术(多层环RF装置)。当离子束通过源抽样孔时，离子束会进行一定程度的扩散。因StepWave的进口设计得足够大，它可以有效地捕获扩散离子云中的所有离子。第一阶段的设计确保了所有离子均有效聚集并进入第二阶段。这项离轴设计确保了进入到源抽样孔的中性物质主动从系统中排出。我们可以看到：当离子云进入MS迁移区时是如何扩散的，而之后当其转移到四极杆分析器区时又是如何聚集为一狭窄的离子束的。不带电的中性化合物因无法穿过这个离轴通路而被排出丢弃。这大大提高了检测限，使生物分析学者们可对血浆、血清和尿液的分析组分在曾经无法达到的水平下进行定量分析。

       通过这项StepWave设计，根据所分析的化合物，我们发现灵敏度竟增加了约10 ~ 25倍。例如：治疗哮喘和鼻炎的现代药物(如：β2激动剂和类固醇激素类药物)不会进入到循环系统且通常都是经吸入给药。这些药物化合物被有意使得在人体全身系统中以极低浓度水平存在，因此适合使用Xevo TQ-S系统进行分析。

       用甲醇将丙酸氟替卡松和沙美特罗琥珀酸盐溶解，然后以不同的生理相关水平注入至血浆中。之后，用2：1的乙腈使血浆样品沉淀并离心分离，将离心后的上清液注入色谱系统。