沉淀血浆重复进样后CORTECS 2.7 µm 色谱柱的性能稳定性

　　目的

　　证实CORTECS® 2.7 µm色谱柱经过沉淀血浆 样品重复进样后的性能稳定性。

　　背景

　　沉淀血浆重复进样后CORTECS 2.7 µm 色谱柱的性能稳定性Jonathan P. Danaceau、Erin E. Chambers、Bonnie Alden 和 Kenneth J. Fountain 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)在分析生物样品时，常常需要考虑保 持LC色谱柱的性能。一般而言，与选 择性更强的样品纯化过程(比如固相萃 取(SPE))相比，类似稀释或蛋白质沉 淀的简单样品前处理技术会导致色谱 柱寿命缩短。CORTECS 2.7 m色谱柱由 实心核颗粒以最优方式装填，设计用 于高效、高扩展性及高耐受性。这其 中也包括在重复接触仅经过最低限度 处理的生物样品之后，依然能保持优 异色谱性能的能力。本技术简报详述 了在沉淀血浆重复进样后，对一组合 成大麻素药物及其代谢物的色谱分离 的稳定性。这些化合物代表了法医与执 法实验室所面对的日益增长的挑战。 鉴于此类化合物的新变种正在源源不 断涌现，实验室通常会依赖于相对无 选择性的样品制备技术，从而确保多 种代谢物与化学物质的高效回收率。 因此，色谱柱需要能够耐受仅最低限 度处理过的样品的重复进样，并保持 其分析性能。

　　解决方案

　　在CORTECS 2.7 µm色谱柱上开发出用于一组合成大麻素药物及其代谢物的LC-MS/MS方法。色谱图 如图1所示。随后色谱柱经受了1000次采用OstroTM样品制备产品制备的血浆的进样挑战。这些 样品板设计用于从生物基质上移除沉淀的蛋白质与磷脂。每进样50至100次已制备血浆后，重 新进行大麻素药物混合物的进样。图2总结了整个实验全部22种化合物的保留时间数据。即便 经过1000次的沉淀血浆进样，这些分析物的保留时间仍然保持一致。为进一步突出色谱的一 致性，图3给出了含有两种同分异构体(化合物9与10)的部分色谱图。即使经过1000次沉淀血 浆的进样，这一对关键代谢物之间的分离度也没有发生变化。此图同样高度显示出其余四种 分析物的峰形与保留时间的稳定性。纵观整个实验进程，这些分析物的保留时间的变化幅度 都不到1%。起始三次进样与最后三次进样的半峰高处的平均峰宽列于相邻表中。这些数据显 示出峰宽并未出现显著的或系统性的变化。此外，实验过程中最大色谱柱反压也未发生变化 。起始的最大反压为3753 psi，而最终进样的最大反压为3749 psi，变化仅为0.1%。因此，无论 以保留时间稳定性、分离度保持、峰形还是反压来衡量色谱柱性能，CORTECS色谱柱都拥有优 异的可靠性，从而获得更长的色谱柱寿命。