Nature重磅 RTCA在细胞治疗方向最新应用

由马萨诸塞州综合医院和哈佛医学院与弗莱堡大学和TCR Therapeutics的研究人员共同合作，使用ACEA Biosciences（a part of Agilent）的xCELLigence RTCA系统发表于Nature Communications上的文章指出CD19特异性TCR融合构建体（TRuC）T细胞被表达CD19靶点的靶细胞激活，并且可以像CAR-T细胞一样有效地杀死这些靶细胞。通过使用与制备28ζ和BBζ CAR-T细胞相同的抗CD19scFv并将它们融合至其他五个TCR亚基中的任何一个的细胞外N末端来开发TRuC-T细胞。该研究表明TRuC-T细胞使用TCR复合物的全部机制，而CAR仅使用有限的信号传导能力。

研究人员使用xCELLigence RTCA系统，测试了TRuC是否可以激活T细胞的细胞溶解程序以及对比了TRuC-T细胞和CAR-T细胞的细胞溶解能力。通过两种方法评估TRuC-T和CAR-T细胞的裂解能力：一种是24小时后表达荧光素酶的Nalm6（Nalm6-LUC）细胞的裂解百分比;另一种是通过基于阻抗的xCELLigence RTCA实时无标记测定，使用表达CD19的HeLa细胞来获取细胞裂解的动力学曲线。 

在两种检测方法中，均使用低效靶比;且T细胞转导效率为25％，在荧光素酶终点检测和杀伤动力学检测中，TRuC-T或CAR-T与肿瘤细胞的比例分别为1:4和1:12。这种低靶细胞比需要T细胞具有连续靶向溶解能力以达到靶细胞的完全裂解。同时，研究人员使用xCELLigence RTCA系统，检测了来自不同供体细胞分别使用TRuC和CAR进行转导后，在效靶比为1:1的情况下的细胞溶解实时动力学曲线。

艾森生物（a Part of Agilent）即将推出的xCELLigence RTCA eSight，同时兼具基于生物传感技术的实时无标记功能和活细胞成像功能。该系统将传统的xCELLigence实时无标记分析技术，同时搭载了明场、3个荧光通道（Red、Green、Blue），可同时对细胞的动力学曲线和细胞动态变化的图像结果进行采集，满足了基于荧光成像的传统方法学和基础实时无标记的动力学的检测，为细胞行为提供了更具洞察力的信息。RTCA eSight Software可将两种数据类型集成统计分析，可生产多参数和多形式的数据，如RTCA图像、既定E:T效靶比下任意时间点的% cytolysis、% cytolysis剂量效应或IC50剂量效应曲线。