Transwell细胞迁移与侵袭技术服务

 细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

服务内容：
1、细胞培养。     
2、Transwell检测。

服务流程：
细胞迁移
1 制备细胞悬液
　　消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，用PBS洗1－2遍，用含BSA的无血清培养基重悬。调整细胞密度至5×10⁴/ml。
2 接种细胞
① 6孔板下室加入1ml含FBS的培养基。
② 取细胞悬液2ml加入Transwell小室。
③ 培养细胞：培养至设定时间，取出下室基底膜。
3 结果统计
用棉签擦去基质胶和上室内的细胞
用95%酒精固定15-20min。
苏木素染色细胞核10分钟。
细胞计数：于倒置显微镜观察照相（放大倍400倍）。
细胞侵袭：
1 Transwell小室制备
包被基底膜：
用50mg/LMatrigel 1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面，4℃风干。
水化基底膜
在上室的聚碳酸酯膜上加入稀释后的Matrigel (3.9ug/ul) 60-80μl (注意体积不可太大，以刚把聚碳酸酯膜浸湿为zei好)，置37℃ 30min使Matrigel聚合成凝胶。
2 制备细胞悬液
　　消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，用PBS洗1－2遍，用含BSA的无血清培养基重悬。调整细胞密度至5×104/ml。
3 接种细胞
  6孔板下室加入1ml含FBS的培养基。
  上室加入细胞悬液
  培养至设定时间，取出下室基底膜。
4 结果统计
用棉签擦去基质胶和上室内的细胞
用95%酒精固定15-20min。
苏木素染色10分钟。
细胞计数：于倒置显微镜观察照相（放大倍数400）

客户需要提供的信息：

1. 检测细胞株（若实验室有，可免费提供）。
2. 待测毒性药物（根据实验方案有无）。
3. 实验设计方案或参考文献。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途