real-time PCR(实时荧光定量PCR)

实时荧光定量PCR（real-time PCR）
    Real-time qPCR就是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。由于Real-time qPCR的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项重要技术，并成为基因表达差异和文章发表不可或缺的部分。
   普瑞华盛real-time qPCR技术服务，根据实验目的，设计实验方案（相对定量或绝对定量；SYBR Green I或Taqman探针方法），用完全按照符合国际标准（MIQE）的real-time qPCR试剂完成实验，提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。
操作流程：
1、客户提供样品及目的基因名称及登录号
2、我公司设计并合成引物及Taqman探针（探针法）
3、样品的RNA提取及逆转录
4、荧光定量PCR检测（3孔重复）
5、提供实验报告,包括实验流程，条件，使用仪器及试剂，标准曲线，扩增曲线，溶解曲线及原始Ct值
6、相对定量数据分析（ΔΔCt法）
服务要求：
细胞样品：新鲜或加Trizol后-80℃保存，数量大于5×106个；
组织样品：-80℃保存，干冰运输，数量大于50mg；
血液：-80℃保存，体积大于300μl；
纯化好的总RNA： OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好；
总DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之间，完整性好；
反转录好的cDNA：体积大于30μl（反转录的总RNA完整性好，纯度在1.9-2.1之间）；
 提供待测基因序列或登录号。
实验报告部分组成：
原始数据
标准曲线
熔解曲线
扩增曲线

 

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途