Sequenom MassARRAY Genotype

质谱是带电原子、分子或分子碎片按分子量（质荷比）的大小顺序排列的图谱。质谱仪可通过对物质的分子量（质荷比）进行检测，达到区分、鉴别物质的目的。SNP位点两个等位基因之间存在分子量差异，通过分型实验将差异放大，然后以质谱仪进行检测即可达到SNP分型的目的。带电物质无电场的真空管（Drift region）中的飞行速度与分子量负相关，分子量越小，飞行速度越快，到达检测器（Detector）的时间越早，反之亦然。
图1：飞行时间质谱检测物质分子量的原理
实验原理：
MassEXTEND单碱基延伸反应，紧挨SNP位点设计一段探针，在反应体系中以ddNTP替代dNTP，使探针仅在SNP位点处延伸一个碱基即终止。根据SNP位点的不同，探针将结合不同的ddNTP，从而具有不同的分子量，质谱仪即可检测出这种分子量差异，从而实现SNP分型的目的。

图2：飞行时间质谱法对SNP进行分型的原理示意图
技术优势：
（1）质谱仪检测的是分子zei本质的特征之一——分子量，不涉及荧光标记、凝胶电泳等，就能检测一个碱基的差异，准确性高，机器本身出错的概率非常低；
（2）质谱仪的灵敏度非常高，检测窗口内，任何pmol级别的物质都能被检测出来；
（3）通量高：几秒就能检测完一个反应孔；
（4）操作简单，仪器要求简单，除质谱仪外，都是常规PCR仪器；
（5）灵活：每天可以完成几个反应至上万个反应；
（6）便宜：引物不带荧光标记，普通长度（3条引物总长80bp左右），此外在一个反应孔内能完成4个或更多的反应，即通常所说的4重反应；
（7）兼容性强：质谱仪还能在核酸的其它方向，以及蛋白质组学、微生物鉴定等领域也能应用。
（8）质谱技术是“一管式操作”，即反应体系在生化学实验过程中始终在一个试管内反应，没有多次转移，这样就减少被污染的概率。
服务路线：

位点选择（a、客户提供 b、公司技术设计）

引物设计（Sequenom Assay design软件设计，zei终确定检测位点）

样本提供（a、全血或组织 b、DNA样本，浓度10-20ng/ul，体积20ul左右）

Sequenom质谱检测

数据分析（关联差异分析、单倍体型分析等）

实验周期在2-3周以内即可全部完成。

联系方式：
北京信科奥达科技有限公司
北京海淀区清华东路东王庄39号院
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网址：www.bjthinkout.com

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途