DNA甲基化(BSP/MSP/qMSP)

DNA甲基化(BSP/MSP/qMSP)

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧***转变为5-甲基胞嘧***（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧***是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是zei主要的甲基化位点，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域，在哺乳动物中mC约占C总量的2－7％。一般说来，DNA启动子区甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。

利用重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧***脱氨基转变成尿嘧***，而在适当实验条件下甲基化的胞嘧***保持不变，再进行PCR扩增，甲基化的位点可以被当作一个C/T的SNP来处理；可用直接测序法来判断是否CpG位点发生甲基化。

※ 服务流程

1、根据待分析的基因组区域信息设计相应引物

2、基因组DNA的提取，利用琼脂糖凝胶电泳明确所提基因组DNA的纯度

3、亚硫酸盐修饰基因组DNA：双链DNA变性解链后，在HSO₃-作用下，C若已有甲基化则无此改变；若DNA CpG Island若无甲基化，则序列中的改变为C→U，CG→UG

4、修饰后DNA纯化回收，并进行引物特异性的PCR

5、BSP,对PCR产物进行测序并且与未经处理的序列比较

6、MSP,对PCR产物进行电泳分析

7、qMSP,对于验证的CpG Island，进行稳定的高度定量和灵敏的甲基化检测分析

※ 客户提供

待分析的基因组区域信息；用于提取基因组DNA的组织材料

※ 优势服务

1、根据待分析的基因组区域信息设计相应引物，特异性位点的DNA甲基化的检测结果

2、可避免样本偏差，在重亚硫酸盐转化步骤后得到更高的定量结果的数据质量

3、引物设计运算法专为甲基化研究而优化，可提供更快的引物设计，及更高的PCR成功率

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途