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慢病毒包装服务
目前常用的病毒载体有腺病毒、逆转录病毒和慢病毒。逆转录病毒载体只能感染分裂期细胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色体上,只能进行瞬时感染。与其它逆转录病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感染非分裂期细胞、容纳外源性基因片段大,可以长期表达等显著优点。慢病毒不产生任何有效的细胞免疫应答,可作为一种体外基因运输的工具。慢病毒载体介导的转基因表达能持续数月,且无可观察到的病理学现象。
重组慢病毒载体构建:英茂盛业采取第3代4载体系统构建重组慢病毒载体,包括重组慢病毒基因表达载体包装服务、重组慢病毒miRNA干扰载体包装服务、重组慢病毒shRNA干扰载体包装服务。
1、重组慢病毒基因表达载体。我们可以使用将目的基因克隆到CMV, C-Fos, PGK, EF1a和MPSV, Ubiquitin等启动子下游。目的基因与载体中包含eGFP基因的共表达以便于***宿主细胞的侵染情况。
2、重组慢病毒miRNA干扰载体。采用CMV、EF1a或PGK启动子启动miRNA转录和表达。 载体中同样包含eGFP基因,可以随时监测对宿主细胞的侵染情况。
3、重组慢病毒shRNA干扰载体。采用H1或U6启动子启动shRNA的表达。
重组慢病毒制备:重组慢病毒制备和简单的逆转录病毒制备相似。我们采用four-plasmid方法瞬时共转染293FT细胞制备重组病毒载体:包装辅助结构(HIV gag-pol, rev, and tat),包膜质粒(env)和慢病毒转移载体。转染细胞温育培养48-72小时以让慢病毒颗粒释放于细胞培养液中。将细胞培养液过滤并超速离心浓缩,通过和GFP共表达的转染细胞的FACS分析、荧光显微镜分析或定量PCR预测病毒的滴度。
重组慢病毒载体特性:一般慢病毒载体是通过30×150mm细胞培养皿制备获得的。
滴定浓度:1×107~1×108TU/ml
zei终体积:1 ml纯化后的病毒液(储存于PBS)
储存:批量储存的zei佳条件为-80°C。
服务价格
我们将采取分步收费的方式,即按照所提供的构建,重组,包装,扩增及纯化的一系列不同的服务,根据客户的实际需要,对每项服务进行具体的核算。客户如需检测其目的基因表达所需费用另行核算。
慢病毒包装服务信息由北京英茂盛业生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于慢病毒包装服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。 注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途 请扫描二维码查看详细参数
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