Primer Extension（引物延伸实验，鉴定转录起始位点）

 服务简介

Primer Extension可以用来精确鉴定转录的起始位点；类似的方法还包括S1 mapping，5'-RACE等。相比而言，Primer Extension更直接、也更精确；但是对实验技术的要求也更高。简单来说，就是在靠近转录产物5'端的位置设计一条反向的引物（引物末端标记），然后与总RNA做杂交，并进行逆转录；zei后通过测序胶电泳检测逆转录产物。为了精确定位转录起始位点（即逆转录产物的长度），还需要利用这条标记的反向引物进行Sanger法测序，并同样进行测序胶电泳来作为ladder。由于整个过程（包括样本收集、RNA抽提、引物退火杂交、逆转录等）都不能有丝毫的RNA降解，所以对其中每一步的操作要求都非常高，否则得到的结果就有可能不是一个位点（多个位点或者一片）或者是假的位点。此外，不是每个转录产物都能够鉴定出转录起始位点，比如有些转录本的丰度特别低就很可能做不出的。

吐露港目前开发出了荧光标记法结合ABI测序仪来鉴定转录起始位点的方法；希望能够为您的实验带来帮助。

服务流程

样本要求

1. 样本要以zei快的速度冻存在液氮、干冰中，然后转移到-80度；干冰运输。

2. 不要用市售的RNA稳定剂保存，然后置于常温。

3. 您可以提供抽提好的RNA，我们收到后会进行质检；如果不过关，则不会进行下一步的Primer Extension实验。

4. 建议在做Primer Extension之前，先做RT-PCR以了解该转录本在该处理条件、该处理时间下的转录情况。

服务收费

说明：若目的基因的转录丰度非常低，我们通过质检会给客户反馈；若客户坚持做后续的Primer Extension实验，那么无论是否能够做出来阳性结果，我们都将收费；若客户接受我们的建议停止后续的Primer Extension实验，那么我们将仍然收取前面的RNA抽提/质检等费用。

Primer Extension（引物延伸实验，鉴定转录起始位点）信息由上海吐露港生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于Primer Extension（引物延伸实验，鉴定转录起始位点）报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途