靶基因重测序多重PCR捕获建库试剂盒(Hi-Primers)

                       Hi- Primers介绍
       精准医学时代，靶向特异区段重测序的需求日益增加，样本量常达上千个，只用传统的Sanger法或目标区域杂交捕获测序价格昂贵。因此基于超高重PCR的扩增子捕获测序应对该区段范围适用性强，针对连续区段，外显子靶标以及客户指定位点，特异设计优化捕获引物，多重PCR一次捕获所有位点，提供预混引物以及反应试剂，方便客户自行实验。
       上海翼和生物超高重PCR建库技术，利用自主开发的多重PCR引物设计软件，结合知识密集型的多重PCR优化技术，克服扩增效率不均一问题，保证每个扩增子间拷贝数的均一性（利用ABI 7900定量PCR检测多重PCR产物，根据ct值判读产物浓度，确保产物间的均一性）。
       使用超高重PCR建库试剂盒Hi- Primers，在建库过程中引物端自动加上区分样本barcode，无需二次建库，两轮PCR完成整个建库过程。试剂盒内容包含：靶向捕获特异性引物Mix，测序平台定制接头，纯化试剂，扩增反应体系等。只需拥有自己的测序平台，Hi- Primers帮您完成建库所有问题。
应用领域：孟德尔遗传性疾病的筛查和诊断，精准医疗研究与应用等。
试剂盒适用测序平台
 

 

Hi- Primers建库流程示意图

试剂盒定制流程

 

引物设计：根据客户需求（对连续区段，外显子靶标以及客户指定位点），基于超高重PCR的扩增子捕获测序，利用上海翼和生物自主开发的引物设计软件，设计特异性捕获引物。
引物优化：利用多重PCR引物优化技术，使扩增子间均一性好，保证每个扩增子间拷贝数差异控制在平均深度的5~10倍以内（利用ABI 7900定量PCR检测多重PCR产物，根据ct值判读产物浓度，确保产物间的均一性），90%扩增子reads数大于15，不浪费测序通量。
试剂盒组成：试剂盒包含包含从扩增到建库到测序前纯化所用到的所有内容，购买一个试剂盒即可完成整个建库过程。
 
试剂盒内容组成

序列内容1Hi -Primers建库试剂盒操作说明书2引物序列信息3定量PCR质检报告4特异性捕获引物Mix（提供1000 Sample预混引物）5上下游标签引物6阴性/阳性对照DNA7PCR扩增反应体系

 
 

试剂盒参数 DNA样本DNA浓度15ng/ul，浓度5-15ng/ul需提前说明均一性95%扩增子测序深度在0.2X平均测序深度以上覆盖度100X平均测序深度，100%扩增子覆盖适用平台Illumina Hiseq2500，Miseq，X10等主流测序平台平均扩增子长度约200bp（游离DNA<150bp）

 

翼和特色内容定量PCR质控结果 覆盖度均一性 

 
试剂盒实验流程

 

靶基因重测序多重PCR捕获建库试剂盒(Hi-Primers)信息由上海翼和应用生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于靶基因重测序多重PCR捕获建库试剂盒(Hi-Primers)报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途