LDR-PCR测序分型技术/SNP分型/遗传多态性检测

1、技术原理

1.1 连接酶检测反应 (Ligase Detection Reaction，LDR)

LDR是利用高温连接酶实现对基因多态性位点的识别。高温连接酶一旦检测到DNA与互补的两条寡聚核苷酸接头对应处存在着基因点突变类型的碱基错配，则连接反应就不能进行。

1.2  PCR-LDR技术分型实验流程

1)     通过多重PCR (Multiplex PCR)获得含有待检测突变位点的基因片断，

2)     进行多重LDR (Multiplex LDR)进行特异性分型检测。

3)     zei后通过测序仪电泳读取检测结果。

1.3实验数据质量控制流程

1)     所有分型信号要求信号清晰唯一，排除不确定信号干扰。

2)     每板数据中都有阴性对照，质控PCR和LDR污染数据。

3)     整个实验服务流程有15%的双盲重复对照，保证数据准确可靠。

4)     利用HWE原理进行数据评估。

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