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转染——让克隆的核酸进入真核细胞中,已经成为研究和控制真核细胞基因表达的重要手段。比如表达纯化特定的蛋白;鉴定一个基因的生物学特性;突变分析;研究基因表达对细胞生长的影响,研究基因表达的调控机制等等,等等。如今广义的转染不单包括了DNA、RNA,还有蛋白质等生物大分子。本篇在这里为大家集中的介绍各种类型的转染原理和经典方法,同时重点介绍下目前市面上常用的商业化转染试剂盒,希望有助于大家了解不同的转染方法所适用的情况以及每种商业化产品的特性。
不论是DNA、RNA还是蛋白质的转染,他们在步骤都是大同小异:细胞的准备;转染试剂和待转染分子按比例的混合;转染复合物的形成;转染复合物滴入细胞;培养箱内孵育让转染复合物进入细胞,换培养基继续培养;检测生化指标。
转染方法分类
1. ***酸钙共沉淀转染法
2. 脂质体转染法(目前用的zei广泛的方法)
3. 化学转染法(仅次于脂质法)
4. 电转法
5. 显微注射和基因枪注射法
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