蛋白表达与纯化技术服务 -- zei低3000.00/蛋白，无风险！

步骤1. 目标基因全基因合成：

1. 从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。
2. 根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化，密码子优化。
3. 合成设计好的基因序列。

提供给客户：目标基因（在T载体或常规穿梭载体上）及测序报告。
价格：3.80元/碱基,如果客户直接提供构建好的质粒，则免去这部分费用．
时间：2~3周，根据基因的大小而定.详见全基因合成服务
步骤2. 目标基因亚克隆：

1. 扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。
2. 将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。
3. 测序验证构建质粒的准确性。
4. 闪晶生物免费提供如下表达载体：

提供给客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。
价格：免费　
时间：1-2周
步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选：

1. 扩增并抽提构建好的表达质粒。
2. 将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。
3. 至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。
4. SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
5. 可提供表达菌株：DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。

提供给客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
价格：免费
时间：1周
步骤4. 目标蛋白表达及纯化：

1. 摇瓶培养1L重组细菌，诱导表达目标蛋白。
2. 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
3. 利用蛋白酶去除不需要的纯化标签，再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
4. 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制zei终产品质量。
5. 通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

提供给客户：纯化好的目标蛋白1~5mg及纯化报告。
价格：
1. 如果目标蛋白含有亲和标签（His-tag or GST-tag）
5,000元（目标蛋白纯度>80，不切除标签）
5,500元（目标蛋白纯度>90，不切除标签）
6,000元（目标蛋白纯度>80，切除标签）
6,500元（目标蛋白纯度>90，切除标签）
2. 如果目标蛋白不含有亲和标签
8,000元（目标蛋白纯度>80）
9,000元（目标蛋白纯度>90）
3. 如果没有获得目标蛋白，则不收取任何费用(仅限客户直接提供构建好的质粒时)。

时间：3~4周
备注：
1. 因为每个重组蛋白的表达量及纯化得率都不相同，我们zei终根据实际情况将给客户提供zei少1mg，zei多10mg的目标蛋白，所收取的费用是相同的。
2. 我们提供的zei终产品一般为保存于常规的缓冲液（Tris-HCl，PBS或乙酸-乙酸钠缓冲液）中蛋白质溶液，并且其中不含有尿素或盐酸胍等变性剂。
3. 每次Western blot检测zei多7个样品，因为要加入阳性对照，阴性对照以及Marker。本步骤只包含一次免费检测，如果需要更多次检测则费用为1500元/次。我们可以免费为客户提供抗His-tag的一抗，如果客户需要使用其他一抗，则需要客户提供。详见 Western Blot 检测服务.

其它相关技术服务
多克隆抗体制备服务
荧光定量PCR检测服务
多肽合成服务
ELISA检测服务
MGB probe
Protein expression
Polyclonal Antibody

上海闪晶分子生物科技有限公司，主要为客户提供全面的生物学服务平台，主要有：
1）基因合成服务：引物设计合成，密码子优化，DNA测序 , TA克隆
2) RNAi 服务，RNAi 载体构建、RNAi 导入优化和干扰评价
3) 蛋白表达与纯化服务，包括哺乳动物、细菌、酵母和病毒表达
4) 多克隆抗体制备和纯化：公司拥有cDNA文库
5) 基因表达分析服务，实时定量PCR ，Western Blot，探针设计合成
6) 克隆服务，包括TA克隆、PCR 克隆和亚克隆、基因突变、载体设计和病毒构建包装等专业服务
7）多肽合成：
8）细胞转染：包括细胞培养，MTT检测，瞬时稳定转染
9） 我公司还出售微型高低离心机，分子生物试剂，实验耗材，广口瓶等。
我们相信自己的经验、技术与能力将能为客户提供更“贴心”的产品与服务，将帮助 科研人员快速、高效获得优质数据，加速生物学、医学类成果的产生与转化。
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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途