慢病毒(Lentivirus)介导

本公司使用的慢病毒表达系统，它由三部分组成：

• 慢病毒表达载体
• 慢病毒包装质粒
• 可产生假病毒颗粒的细胞系

慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。

服务流程

对于活体 RNAi实验模型，吉玛公司可以为您生产高质量的病毒液，服务流程如下：

• 根据目的基因相关信息（序列，序列号等），利用高效的设计软件，设计 siRNA序列，针对每条目的基因，我们设计3条siRNA序列，其中1条序列为阴性对照组；
• 根据设计好的 siRNA序列，设计，合成两条互补的短片段的DNA；
• 对合成好的 DNA片段进行稀释，退火，连接到线形化处理过的载体，转化，涂平板，过夜培养；
• 通过 PCR的方法筛选阳性菌落，进行测序，分析测序结果；
• 对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒；
• 利用构建好的质粒做转染实验， 48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因，筛选出一条zei有效的siRNA序列；
• 筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液；
• 浓缩、纯化病毒液，测定滴度；

提供高质量的病毒液给客户（对于活体实验，我们提供的病毒基本单位为 1×10⁸ifu ，这个单位为一只小鼠一次实验的平均用量）

基于慢病毒系统的 RNAi沉默效果

慢病毒(Lentivirus)介导信息由上海吉玛制药技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于慢病毒(Lentivirus)介导报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途