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PDTX 模型建立

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人来源肿瘤异种移植于免疫缺陷小鼠模型在肿瘤研究中,特别是在新型药物的筛选、 个体化治疗的评估研究上取得一定的成效,移植肿瘤保留了原代肿瘤的分化程度、形态特征、结构特点以及分子生物学基本特性和肿瘤微环境,是目前较理想的肿瘤模型。小鼠肿瘤模型一直以来都是作为医学研究体内实验的zei基本的模型,其建立也是日新月异,特别是转基因小鼠例如:SCID, NOD/SCID, NOD/SCID/gc-null (ie, NSG) mice 的建立为异种移植提供了无免疫排斥小鼠模型,并为人类肿瘤异种移植模型的建立及移植肿瘤的传代奠定了更加坚强的基础但是,这种模型也有它的缺陷之处,PDTX 模型虽然模拟 了原代肿瘤的生物学特性,能为肿瘤的研究提供体内模拟环境,但是这种模型的建立毕竟 不是完全和原代肿瘤相同,而且种植的肿瘤出现转移的情况比较少,如何提高移植肿瘤的 微环境相似性和原代肿瘤转移成功率是以后建立恶性肿瘤模型的一个重要的方向。人来源肿瘤异种移植zei理想且更加贴近肿瘤微环境的移植方式是原位移植,在肝癌 、胰腺癌 、前列腺癌 、乳腺癌 和神经胶质瘤的研究中均有报道。在相同状态下,这种移植位点是zei理想的,但我们可以看到,这种肿瘤移植模型的建立是比较困难的,特别是一些肿瘤位置例如消化道肿瘤,因其原位处于消化道腔内,其移植的成活率和成功率都是很低的,因此阻碍了其广泛应用,只限制于某些特殊肿瘤。  PDTX 模型的建立方法及步骤如下:

  1. 在取回组织后,将组织放入传递窗;
  2. 准备好加了双抗的PBS缓冲液,和DMEM培养基,培养皿和冰袋。(以下操作都应在超净台内完成)
  3. 倒入适量的PBS和DMEM与冰上的培养皿中,取出组织,放入PBS中初步清洗,提出坏死和正常组织;如果坏死比较严重的,可以适当清洗两次;
  4. 将PBS中的组织转移至DMEM中,先预留四块以上的150~300 mm3左右的组织;
  5. 将剩余组织剪成20~30mm3的组织小块,使用穿刺针接种种于小鼠的腋下背部和后退部 ,每只接种四个部位(如右图);
  6. 穿刺针使用注意事项(1、使用前一定要灭菌,灭菌时内芯和外套要分开来灭, 2、使用时不要放在桌面,悬空放置在皿上,3、左手持针,针头45°朝上,右手夹取一块组织,一边塞一边后退,使组织进入套管针中,4、穿刺前用酒精棉擦拭穿刺部位,5、使用后清理时,要注意清理套管针内部,防止有组织残留。)
  7. 将预留的组织取两块放入福尔马琳,取两块以上(越多越好)放进液氮冻存。
  8. 之后定期观察就好

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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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