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DNA甲基化测序(Reduced Representation Bisulfite Sequencing,RRBS))

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可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?

 DNA甲基化测序RRBS

Reduced Representation Bisulfite Sequencing(RRBS)是一种准确、高效、经济的DNA甲基化研究方法,通过酶切富集启动子及CpG岛区域,并进行Bisulfite测序,同时实现DNA甲基化状态检测的高分辨率和测序数据的高利用率。DNA甲基化研究一直是疾病研究的热点,与基因表达、表型性状息息相关。RRBS作为一种高性价比的甲基化研究方法,在大规模临床样本的研究中具有广泛的应用前景。

技术优势

·         精确度高:在其覆盖范围内可达到单碱基分辨率;

·         重复性好:多样本的覆盖区域重复性可达到85%-95%,适用于多样本间的差异分析;

·         检测范围广:覆盖全基因组范围内超过5百万个CpG位点;

·         性价比高:测序区域更有针对性,数据利用率更高。

研究结果充分证明了RRBS技术的可靠性。RRBS可作为一种更高效经济的研究方法,可应用于检测全基因组启动子和CpG岛区域DNA甲基化状态。

分析内容

1. 数据产出统计:对测序结果进行图像识别、去污染、去接头,统计结果包括read长度、read数据、数据产量;

2. RRBS序列与参考序列的比对;

3. Promoter和CpG岛(CGI)覆盖度分析;

4. Promoter和CGI区甲基化分析;

5. 差异性甲基化区域(DMR)分析。

参考文献
[1] Wang L, Sun J, Wu H, et al. Systematic assessment of reduced representation bisulfite sequencing to human blood samples: A promising method for large-sample-scale epigenomic studies. J Biotechnol. 2012.

[2] Li S, chowdhry, Liu F et al.  Tumor-Suppressive miR148a Is Silenced by CpG Island Hypermethylation in IDH1-Mutant Gliomas. Clin Cancer Res. 2014.

[3] Terragni J, Zhang G, Sun Z, et al. Notch signaling genes: myogenic DNA hypomethylation and 5-hydroxymethylcytosine. Epigenetics, 2014.

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