EMSA凝胶迁移检测-迁移凝胶实验结果解读

EMSA

一、EMSA服务介绍
  
凝胶迁移或电泳迁移率实验EMSA（Electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白及其相关DNA结合序列相互作用的实验技术，可用于定性及定量分析。该技术目前已广泛用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列相互作用。

EMSA实验通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳上，分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同，可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白，可用纯化蛋白，部分纯化蛋白，或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时，依据目的RNA结合蛋白的位置，可用纯化或部分纯化的蛋白，也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特异），和其它非相关的片段（非特异），来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下，依据复合物的特点和强度来确定特异结合。
 

 
EMSA实验原理图

 
二、EMSA服务内容
 
1. 生物素标记探针；
2. 抽提核蛋白；
3. 配置非变性聚丙烯酰胺凝胶；
4. 特异性的证明(首次使用的探针序列需证明其是否与目的蛋白特异性结合，确定目的条带的位置)；
5. 加入生物素标记的探针；
6. 做EMSA检测；
7. 结果分析，出具实验报告。
 

三、EMSA服务说明
  
1.如需EMSA服务，强烈建议不要自行抽提和蛋白及相应的浓度测定。主要因为：1）我们无法确定所用抽提试剂适合之后的实验操作步骤；2）不知道待测的转录因子是否降解活、活性也可能受到影响；3）由于各种原因无法确定抽提物中是否含有待测的转录因子。

2.本市样品交接传递请联系相应的客服专员，本公司会负责样品的交接。外地用户的样品交接使用我公司的建议的样品传递方式进行交接。

3.具体的因合同及待测样本量变化而变化，因此请与客服专员联系。
 

四、EMSA服务质量保证
  
1．  权威完整的实验报告；
2．  真实的原始实验数据；
3．  详细的实验步骤。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途